骨髓间充质干细胞对高低转移潜能肝细胞癌肿瘤生长情况的影响

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目的制作人高低转移潜能肝细胞癌肿瘤裸鼠动物模型,观察人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对高低转移潜能肝细胞癌动物模型中肿瘤生长情况的影响,并检测动物模型标本中转移相关因子和凋亡相关因子的表达情况。方法制作人高转移潜能肝细胞癌(High metastatic hepatocellular carcinoma,MHCC97-H)和人低转移潜能肝细胞癌(Low metastatic hepatocellular carcinoma,MHCC97-L)动物模型,将MHCC97-H和MHCC97-L动物随机分为2组,分别为MHCC97-H模型实验组、对照组,MHCC97-L模型实验组、对照组。在接种肿瘤第7天后,实验组开始进行尾静脉注射BMSCs5×105/每鼠,对照组注射BMSCs培养液0.2ml/每鼠。实验开始后每3天用卡尺测一次皮下肿瘤体积,分别在肿瘤接种后第13d,16d,19d,22d,25d,28d,31d,34d,37d,40d处死动物,完整剖取瘤块并称瘤重,计算肿瘤抑制率。制作MHCC97-L动物模型,将MHCC97-L动物随机分为实验组和对照组,实验组与对照组处理方法与上述相同。不同之处在于,实验开始后每周测量一次皮下肿瘤体积,分别在肿瘤接种后第2、3、4、5、6周处死动物,完整剖取瘤块并称瘤重,计算肿瘤抑制率。采用Real-time PCR法对MHCC97-L动物模型标本中转移相关因子骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、骨唾液蛋白(Bone sialoprotein,BSP)、整合素(IntegrinαV)基因和凋亡相关因子Bcl-2、Bax、caspase3基因的表达进行检测。结果BMSCs对MHCC97-H动物模型中肿瘤重量和体积未表现出抑制作用,实验组肿瘤重量和体积总是高于对照组,统计学分析结果显示实验组与对照组肿瘤重量和体积的差异在第13d具有统计学意义;BMSCs对MHCC97-L肿瘤重量和体积表现出抑制作用,实验组与对照组肿瘤体积差异在第22d具有统计学意义,实验组高于对照组,其余时间肿瘤重量和体积均表现为实验组低于对照组。BMSCs对MHCC97-L肿瘤重量和体积均表现出抑制作用,实验组肿瘤重量和体积总是低于对照组,统计学分析结果显示实验组与对照组肿瘤重量差异在第3周具有统计学意义,实验组肿瘤重量显著低于对照组;实验组与对照组肿瘤体积的差异作用在第2、3、5、6周均具有统计学意义,实验组肿瘤体积显著低于对照组。实验组肿瘤转移相关因子OPN、BSP、IntegrinαV的表达均显著低于对照组,BMSCs干预后肿瘤促凋亡相关因子Bax、caspase3的表达呈升高趋势,抗凋亡相关因子Bcl-2的表达逐渐下降。结论BMSCs对MHCC97-H的生长不具有抑制作用,对MHCC97-L的生长具有抑制作用,第3周时BMSCs对肿瘤重量和体积的抑制效果表现的最为明显,随着时间的延长,抑制效果逐渐减弱。
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