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目的:探讨碘染色法与改良培养法在人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)检出中的应用,并以此获得虫株后建立B.h纯培养体系,进而采用纯培养虫株建立SD大鼠感染模型,动态研究B.h感染大鼠的Th1/Th2平衡调节。方法:比较普通培养法和改良培养法的最低检出限、生长曲线及厌氧环境形成时间;从广西医科大学附属肿瘤医院门诊检验科收取397份粪便样本,采用碘染色法和改良培养法对样本进行检测,对阳性标本采用碘染色法和三色染色法进行染色观察,比较阳性检出率,以改良培养法为金标准,计算碘染色法的灵敏度、特异度、一致率和kappa值,采用PCR方法进行基因分型;采用LES培养基进行带菌培养,联合使用青霉素(1000U/ml)、链霉素(1000ug/ml)、两性霉素B(2.5 ug/ml)、磷霉素(20ug/ml)、阿莫西林-克拉维酸钾混悬液(31.25ug/ml)、氯霉素(20ug/ml)等6种抗生素进行无菌纯培养,使用鸡蛋上清液-马血清-Bacto agar混合琼脂平板,进行单克隆试验;获取纯培养虫株后,取30只SD大鼠,分5组,每组6只,经地塞米松免疫抑制后,实验组经口感染107/只,对照组经口灌食等量灭菌PBS,分别于0d、3d、6d、9d和14d处死大鼠取材,酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assays,ELISA)检测大鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10的表达水平,比色法检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的含量,HE染色观察结肠组织病理损伤,荧光定量PCR检测结肠中IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10 mRNA的表达水平。结果:改良培养法的最低检出限低于普通培养法,改良培养法在b.h的密度在前3天高于普通培养法;在粪便及短期培养的标本中,可观察到空泡型和颗粒型,在粪便标本中可以观察到包囊;碘染色法的阳性率为1.01%,改良培养法的阳性率为5.54%,两者的阳性率差别有统计学意义;以改良培养法结果为金标准,碘染色法的灵敏度为18.18%,特异度为100%,一致率为95.47%,kappa值为29.57%;带菌培养和纯培养的b.h均以空泡型为主,带菌培养和纯培养的密度到达峰值的时间基本相同,但是带菌培养的密度下降很快,纯培养的密度下降缓慢,维持较高的密度;在鸡蛋上清液-马血清-bactoagar混合琼脂平板表面可观察到“菌落状”白色圆点,倒置显微镜下可看到大量空泡型虫体;感染大鼠与对照组的结肠病理评分为0分,感染大鼠结肠的mpo含量与对照组相比无显著改变;感染大鼠血清中ifn-γ和il-4的表达水平与对照组相比无显著改变,14d组大鼠血清中tnf-α与对照组相比较有显著改变(p=0.002),3d组(p=0.003)、6d组(p=0.013)、9d组(p=0.004)、14d组(p=0.000)大鼠血清中的il-10与对照组相比较均有统计学意义;各组结肠中细胞因子ifn-γmrna表达比较具有统计学差异(f=144.979,p=0.000),其中3d组、6d组和14d组与对照组相比较均具有统计学意义(p<0.05);各组大鼠结肠中的tnf-αmrna比较具有统计学意义(方差不齐,welch检验,f=5.837,p=0.021),但组间两两比较均无统计学意义;各组结肠中细胞因子il-4mrna表达比较具有统计学差异(f=8.917,p=0.006),其中6d组和9d组与对照组相比较均有显著改变(p<0.05);各组大鼠结肠中的il-10mrna比较具有统计学意义(f=3.575,p=0.023),其中6d组与对照组相比较有显著改变(p<0.05)。结论:改良培养法的灵敏度高于碘染色法,可用于b.h的实验室诊断;联合大剂量使用抗生素可以获得纯培养的虫株并用固体培养基实现b.h的单克隆,且体外纯培养的B.h虫株可成功感染SD大鼠;ST3型B.h感染可影响大鼠Th1/Th2的平衡调节。