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西花蓟马是危害园艺作物的世界性害虫。该害虫于2003年首次在北京发现,近年来已迅速蔓延至我国大部分地区,危害日趋严重。西花蓟马在入侵过程中,在夏季常常遭遇夏季的高温和冬季的低温胁迫,但有关该害虫的温度耐受性及其调控机制还未见报道。本文采用生态学和分子生物学的方法,研究了温度胁迫对西花蓟马的存活能力、繁殖的影响及温度胁迫后西花蓟马热蛋白的表达变化等内容。其主要结果如下:研究了不同低温和不同暴露时间对西花蓟马存活率和繁殖的影响。结果表明,西花蓟马的存活率在暴露温度的降低和暴露时间的延长而逐渐降低。在1-6h范围内,杀死50%西花蓟马若虫所需的温度(Ltem50)分别为-13.6、-12.5、-11.2、-10.4℃,这些值要高于响应时间下杀死雌成虫的Ltem50,但低于杀死雄成虫的Ltem50。因此,西花蓟马不同发育时期的耐寒性强弱顺序可表示为:雌成虫>若虫>雄成虫。成虫和若虫暴露于-13℃和-13.5℃下2h后,其存活率分别为25%和27%。根据识别温度定义,这两个温度分别被定义为若虫和成虫的识别温度。将成、若虫在0或5℃驯化2h后,再置于各自识别温度下,其存活率都得到了明显提高。其中,在0℃下驯化2h后,若虫和雌雄成虫的存活率得到了最大幅度的地提高,分别达46%、54%、49%。西花蓟马若虫经不同低温处理后,其发育历期、羽化后的成虫寿命、产卵时间与对照相比无显著差异,但产卵量显著降低;成虫经过低温处理后,其寿命,产卵量和产卵时间明显降低。调查了不同高温(33、35、37、39、41℃),暴露时间(0.5、1、2、4h)以及发育时期对西花蓟马存活及繁殖的影响。结果表明,西花蓟马成虫(雌虫和雄虫)和若虫的存活率在高温下随暴露时间的延长而显著降低,杀死成虫和若虫50%个体的温度在在0.5到4h范围内随时间的延长而逐渐降低。因此,西花蓟马不同发育时期的耐热性强弱顺序可表示为:雌成虫>若虫>雄成虫。奇怪的是,成虫在31℃,若虫在33℃下预热处理2h后,显著提高了其在致死高温下的存活率。经过2h的高温暴露后,西花蓟马成虫的寿命和产卵量随温度的升高显著降低。高温下的交配实验表明所有交配处理(U♂+S♀S♂+U♀,S♂+S♀)的寿命和产卵量显著低于对照组(U♂+U♀)。U♂+S♀交配组合下的寿命与S♂+U♀组合无显著差异,但显著高于S♂+S♀组合;U♂+S♀组合下的产卵量显著高于S♂+U♀组合,但与S♂+S♀组合的产卵量相当。采用RT-PCR和RACE的方法从西花蓟马中克隆了5个热激蛋白基因,并分别命名为Fohsp90, Fohsc701, Fohsc702, Fohsp60和Fohop。Fohsp90, Fohsc701, Fohsc702, Fohsp60和Fohop的cDNA全长分别为2508,2195,3065,2489,2276bp,其开放阅读框分别为2169,1920,1983,1728和1659bp。5个开放阅读框分别编码722,639,660,575和552个氨基酸,推测的分子量大小分别为83.26,69.81,72.73,60.87和62.25KDa。序列分析发现5个热激蛋白与其他物种具有很高的相似性,并含有各自家族的保守基序。基因组和cDNA序列的比较分析发现,5个hsps分别含有3,4,7,5和10个内含子。此外,5个hsps内含子的数量和插入位置与其他物种相比存在高度差异。最后,5个Hsps的系统发育分析表明本研究所获得的5个Hsps为各自家族的同源物。采用Real-time PCR检测了5个西花蓟马热激蛋白基因(hsp90, hsc701,hsc702, hsp60, hop)在不同发育时期和不同温度胁迫下的表达模式。不同发育阶段的表达模式表明,5个hsps在若虫,蛹和成虫时期具有表达,其中hsp90, hsc701和hsp60随着发育的进行呈显著的上调表达,而hsc702和hop的表达水平在三个时期无显著差异。在成虫和若虫期,5个hsps对低温不十分敏感,但都能被高温诱导上调表达,而且经高温诱导后若虫期5个hsps的表达水平显著高于成虫。西花蓟马成虫和若虫经高温驯化后,其表达水平显著高于直接暴露致死温度下的表达水平。研究了温度的升高和亚致死剂量阿维菌素对西花蓟马的生物学参数、抗氧化酶和热激蛋白表达的影响。结果表明:温度和阿维菌素浓度对西花蓟马的生物学参数具有显著影响。存活率、寿命和产卵量随温度和阿维菌素浓度的升高而明显降低。温度和阿维菌素显著降低了SOD的活力,温度的升高对CAT的活力没有显著影响,但阿维菌素与之的相互作用显著提高了其活力。然而,温度和阿维菌素浓度及其交互作用显著提高了POD和GST的活力。hsps的表达模式表明,温度的升高仅能诱导hsp90、hsc702、hop的上调表达。然而,温度和阿维菌素的联合作用导致5个hsps的显著上调表达,其中hsp90、hsp701、hsc702和hop在33℃最大值,hsp60在21℃达最大值。综上所述,西花蓟马较强的温度耐受性和快速驯化能力可能是西花蓟马能迅速入侵扩散的重要因素,其内在机制(特别是在高温胁迫下)可能与分子伴侣热激蛋白的上调表达有关。