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smrL是分离自新疆达坂盐湖沉积土样的Na+/H+逆向转运蛋白基因,携带smrL的重组子能够在含0.6M NaCl浓度的LBK培养基上生长。选择smrL基因编码蛋白的跨膜区可能与离子转运和pH调控相关的5个氨基酸残基(L6,E13,K21,Y59,T63)进行定点突变,并研究突变体的功能特性。结果表明,突变体L6A、E13A、Y59A均不能在含0.25M NaCl浓度的LBK培养基上生长；突变体L6A、E13A、Y59A、E13D、K21A均不能在含0.01M LiCl的LBK培养基下生长。除E13D外,其余突变体的Na+/H+逆向转运蛋白活性降低,且L6A、Y59A的Na+/H+逆向转运蛋白活性向碱性端偏移,K21A、T63A的活性则向酸性端偏移0.5个pH单位。T63A无Li+/H+逆向转运蛋白活性,L6A、E13A、Y59A、E13D、K21A的Li+/H+逆向转运蛋白活性降低,并且突变体L6A、E13A的Li+/H+逆向转运蛋白活性向碱性端偏移,而K21A、Y59A向酸性端偏移0.5个pH单位。质粒pUCNHD携带nhadl和nhar两个Na+输出相关基因,通过亚克隆,分别构建了含nhadl与nhar基因的重组质粒。功能互补实验表明,重组子KNabc/pUCnhadl能在含0.2MNaCl的培养基上生长,而KNabc/pUCnhar则不能在含02M NaCl的培养基上生长。耐盐性实验表明,KNabc/pUCnhadl能够耐受0.5MNaCl和0.2M LiCl。活性测定结果表明,由KNabc/pUCnhadl菌株制备的翻转膜具有高的Na+/H+和Li+/H+逆向转运蛋白活性,无K+/H+逆向转运蛋白活性。动力学分析结果表明,nhadl编码蛋白对Na+和Li+的Km值分别为1.45和2.94,说明Nhadl对Na+具有较强的亲和力。