不利的天气和土壤等环境条件是影响番茄产量和品质的重要因素,特别是近年来环境条件不断恶化,使地球上的生物有机体包括番茄遭受到越来越严重的危害,由此番茄抗逆性改良就显得更加迫切和重要了。随着现代分子生物学的飞速发展,一些与番茄抗逆能力有关的基因也逐渐被分离克隆,并应用于番茄抗逆改良。本文中采用的抗逆基因BOUNTIFUL(BFL)是从拟南芥中分离出的一种携带转录辅因子的AT-hook DNA突变体,国内外还未见有采用此突变体转化番茄的报道。本研究通过农杆菌介导的番茄叶盘转化法进行番茄的遗传转化,进行了抗逆基因BFL在番茄中的遗传转化研究,实验过程中得到结果如下:1、建立了番茄转化再生体系以根癌农杆菌COR308介导,叶盘转化法建立了‘M82’番茄转化再生体系。筛选了适于番茄转化的培养基配方;确定了50mg/L的卡那霉素为番茄‘M82’转基因的最适抗性筛选浓度,在转化过程中始终以50mg/L的卡那霉素进行连续的转化苗的筛选工作,极大地减小了转化植株的验证和栽培管理工作量,提高了转化生根植株的阳性率,在最后得到的所有生根植株中阳性株比率超过70%。2、BFL基因对番茄的遗传转化分析我们将来源于拟南芥中的BFL基因通过农杆菌介导法导入‘M82’番茄中,并获得53株转化植株,从表型看,大部分植株表现为植株生长旺盛,株型紧凑,具有更多丛生具皱的叶子,并且叶片面积增大。通过PCR初步检测表明,其中38株转化植株整合了外源BFL基因,对这些植株进行RT-PCR分析,检测到外源BFL基因在这些植株中都有不同程度的表达。同时对这些植株叶片进行组织化学染色法检测到GUS报告基因在植株叶片中表达。另外对叶片结构的分析也表明,转化植株叶片表皮细胞是野生对照植株叶片的表皮细胞体积的1.5倍。