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背景椎间盘退行性变导致的椎间盘疾病是临床上引起患者颈腰部及四肢疼痛的常见原因,传统的保守及手术治疗效果往往不理想。如果能从椎间盘退变的初始环节进行人为的干预,阻断甚至逆转椎间盘退变,将会为椎间盘退变性疾病提供良好的治疗途径。目前多名学者已证实Sox9基因可调控Ⅱ型胶原及软骨的合成,是Ⅱ型胶原及软骨合成的一种关键因子。椎间盘组织是由中间的髓核、外围的纤维环和上下软骨终板组成,其中软骨终板是椎间盘的重要构成,在髓核的营养交换及椎间盘的应力缓冲保护等方面,它起重要作用,椎间盘的营养物质主要是由软骨终板弥散到髓核和内层纤维环组织的。有多名学者提出椎间盘退变的始动环节是由于软骨终板的退变,功能下降及钙化引起的。徐宏光等通过在体外建立大鼠终板软骨细胞自然退变模型,研究探讨了终板软骨细胞在自然退变的过程中Sox9基因的变化和作用,对终板软骨细胞的分化和发育起关键作用的Sox9mRNA的表达随着年龄的增长受到了明显的抑制,导致Ⅱ型胶原的mRNA表达下降,Ⅱ型胶原蛋白的合成和代谢发生紊乱。Ⅱ型胶原蛋白是维持软骨终板和椎间盘功能的重要成分,它的减少可以导致终板软骨细胞外基质成分和结构的变化,从而引起软骨终板发生退变。随着细胞生物学、分子生物学和组织工程学的飞速发展,对IVDD的治疗有了新的手段,包括基因疗法、生长因子疗法、细胞疗法以及干细胞移植等,这些治疗方法统称为生物学治疗方法,生物学治疗方法大部分是针对椎间盘的治疗,阻断或逆转髓核、纤维环的退变,来达到治疗的目的,已有多名学者将Sox9基因转染到椎间盘髓核和纤维环组织中,观察其生物学效应,但尚无学者将外源性Sox9基因转染到终板软骨细胞并观察其生物学效应。本实验是通过将外源性Sox9基因转染到终板软骨细胞,观察其对蛋白聚糖和Ⅱ型胶原合成的影响。以达到减缓或阻断、甚至逆转椎间盘退变的目的,从椎间盘退变的始动环节延缓或阻止椎间盘的退变,为Sox9基因治疗软骨终板的退变提供理论依据。目的分离兔终板软骨细胞并体外培养；腺病毒体外转染终板软骨细胞,观察Sox9基因对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖合成的影响,进一步为椎间盘退变提供基因治疗方法,减缓椎间盘退变的时间和进程,从而为防治椎问盘退变提供一定的理论依据。方法采用第二代终板软骨细胞,随机分为三组,1、对照组：不做任何处理,2、空腺病毒组：转染不含Sox9的腺病毒,3、AdSox9基因转染组：转染AdSox9基因。腺病毒载体AdSox9成功感染了体外培养的兔终板软骨细胞,用RT-PCR技术检测病毒感染前后Ⅱ型胶原和蛋白聚糖基因1mRNA的表达的变化。结果腺病毒AdSox9成功感染终板软骨细胞后48h,RT-PCR结果显示对照组、空腺病毒组及AdSox9转染组均检测到了Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达,而AdSox9感染的终板软骨细胞组中,检测到了Ⅱ型胶原、蛋白聚糖基因]mRNA的显著表达。AdSox9转染组与对照组和空腺病毒组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),组间比较应用LSD-t检验,结果显示对照组和空腺病毒组比较无统计学意义,AdSox9转染组与空腺病毒组及对照组两两比较均有显著性差异(P<0.05),以上结果表明,重组腺病毒介导的Sox9基因显著增加了蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的mRNA的表达。结论Sox9基因有促进终板软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的能力；Sox9基因能够防治终板软骨细胞的退变,从而在始动环节为基因治疗椎间盘退变增加了新的理论依据。