脊髓NMDA受体在大鼠慢性内脏高敏机制中的作用

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目的1.建立大鼠慢性内脏高敏感模型。2.观察脊髓NMDA受体与慢性内脏高敏感的关系,探讨慢性内脏高敏感的可能机制。方法研究选用SD大鼠,模型组大鼠在出生后第8-15天内,每天接受一次结直肠扩张刺激;对照组大鼠在出生后8-15天,除了不行结直肠扩张刺激外,其他情况同模型组。大鼠成年后用腹部回缩反射(AWR),进行肠道敏感性评估。模型组和对照组通过鞘内注射方式,分别给予NMDA受体阻断剂MK-801和人工脑脊液,观察各组之间腹外斜肌放电有否存在差异;同时运用免疫组化法观察NMDA-NR2B受体的在各组脊髓中表达及分布情况。结果1.模型成功的评价方式①采用AWR评分评价内脏敏化程度在20~60mmHg CRD时,模型组AWR评分显著高于对照组(P<0.05),而在80mmHg CRD时两组评分差异不明显;对照组痛阈为30.418±1.34mmHg,模型组痛阈为13.125±1.34mmHg(P<0.001)。②腹外斜肌放电测量评价内脏敏化程度在20~60mmHg CRD时,模型组腹外斜肌放电明显高于对照组(P<0.05);两组痛阈分别为:对照组37.5±4.53mmHg,模型组25.0±3.27mmHg(P<0.05)。2.鞘内注射给予NMDA受体阻断剂—MK-801(1.5nmol/10μl)后,模型组腹外斜肌对CRD反应较给药前显著(P<0.05),痛阈显著升高(P<0.05);而对照组腹外斜肌对CRD反应较给药前无明显改变,痛阈变化不显著。3. NMDAR-2B在相应脊髓节段中表达模型组与对照组大鼠在脊髓相应节段背角各层中可见数量不等的NMDAR-2B阳性细胞,多为圆形或椭圆形的神经元,胞浆着色呈棕黄色。图像分析结果显示,模型人工脑脊液组较对照组显著升高(P<0.01);但给予MK-801后,模型组表达降低(P<0.05)。结论1.模型组大鼠存在慢性内脏高敏的表现。2.AWR和腹外斜肌放电测量两种方法均可用于评价大鼠内脏高敏状态。3.大鼠脊髓NMDA受体可能参与慢性肠道高敏感机制。
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