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目的：利用bac-to-bac杆状病毒表达系统对RGDV-P8和RGDV-Pns10基因加以表达，得到RGDV-P8和RGDV-Pns10基因的真核表达产物，为RGDV-P8和RGDV-Pns10的功能研究奠定基础。方法：在RGDV-P8和RGDV-Pns10基因组片段的基础上设计引物，扩增得到RGDV-P8和RGDV-Pns10 ORF，将其克隆到供体质粒pFastBacTMHTb中，经PCR、酶切和测序鉴定后，将测序正确的质粒转化DH10Bac菌，经筛选、鉴定后，抽提并获取高纯度的重组穿梭载体Bacmid-RGDV-P8和Bacmid-RGDV-Pns10。用脂质体介导法将重组穿梭载体Bacmid-RGDV-P8和Bacmid-RGDV-Pns10转染Sf9昆虫细胞，获得重组病毒，并反复扩增后得到大量表达RGDV-P8和RGDV-Pns10蛋白的重组杆状病毒。用重组的杆状病毒再次感染sf9昆虫细胞得到RGDV-P8和RGDV-Pns10融合蛋白，对融合蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果：1．构建了携带RGDV-P8和RGDV-Pns10基因片段的重组供体质粒pfastbacHTb-RGDV-P8和pfastbacHTb-RGDV-Pns10，经双酶切鉴定和序列分析证实RGDV-P8和RGDV-Pns10基因已正确插入供体质粒的多克隆位点。2．构建了携带RGDV-P8和RGDV-Pns10基因片段的重组穿梭载体Bacmid-RGDV-P8和Bacmid-RGDV-Pns10，经PCR鉴定分析证实RGDV-P8和RGDV-Pns10基因已正确转座插入穿梭载体的转座位点。3．用bac-to-bac系统表达了RGDV-P8和RGDV-Pns10融合蛋白，并经SDS-PAGE、Western-blot分析鉴定，分子量约为48kD和38kD，与融合蛋白的理论分子量相符。结论：本研究成功地在杆状病毒-昆虫表达系统中表达了RGDV-P8和RGDV-Pns10蛋白，为RGDV-P8和RGDV-Pns10蛋白进一步的功能研究和实际应用奠定了良好的基础。