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驽巴贝斯虫(Babesia caballi)是一种经蜱传播的血液原虫，可引起马属动物发热、贫血、黄疸和水肿，严重的可致死。该病被世界动物卫生组织(0IE)列为B类疫病，给养马业造成了巨大的经济损失。驽巴贝斯虫管状蛋白主要起到侵入红细胞的作用，是抗驽巴贝斯虫裂殖子疫苗的候补蛋白。BC-48基因编码驽巴贝斯虫裂殖子管状蛋白，而且是该虫属比较重要的保守基因。本研究利用PCR技术扩增和克隆了610 bp驽巴贝斯虫中国吉林株BC-48基因片段，对所克隆的BC-48基因序列与基因库中已发表的序列(U46551)进行比较分析。结果表明同源性达到97.1％，证明了该基因片段为驽巴贝斯虫BC-48基因。将BC-48基因克隆至原核表达载体pGgX-4T-2，经酶切鉴定及PCR鉴定，证明成功构建了融合表达载体pGEX-BC48。将构建好的融合表达载体，在1mmol／L的IPTG诱导下，在大肠杆菌BL21中得到大量表达，经过8h表达量达到高峰。融合蛋白GST-BC48的分子量为45ku，大部分以可溶性蛋白的形式存在。用亲和层析方法对GST-BC48融合蛋白进行了纯化，获得了理想的纯化结果。Western-blotting免疫印记分析，融合蛋白与驽巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应，而同马巴贝斯虫阳性血清没有交叉反应。说明该蛋白具有很好的抗原性和特异性。本研究应用纯化后的GST-BC48融合蛋白建立了检测驽巴贝斯虫抗体的间接ELISA方法。结果表明，抗原浓度为2.5μg／mL、被检血清稀释度为1：160、酶标二抗稀释度为1：4 000为最佳工作浓度。该方法不与新孢子虫、弓形虫、马巴贝斯虫等阳性血清发生交叉反应，具有较好的特异性；该方法与玄学南等建立的间接ELISA方法平行检测132份马血清样本，结果表明，所建立方法更加敏感。说明建立的ELISA适用于驽巴贝斯虫抗体的检测。