论文部分内容阅读
从江苏省新沂市丰乐化工有限公司长期受百菌清污染的土壤中分离、筛选到1株百菌清的高效降解菌株BJQ-3,根据其生理生化特性以及16S rRNA基因的系统发育分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。对菌株BJQ-3的生物学特性进行了研究,菌株BJQ-3的最适生长温度为30℃,最适pH值为7.0,NaCl浓度为1-3%,对葡萄糖、丁二酸钠和乙酸钠等碳源利用最好,对蛋白胨和酵母汁有机氮源利用最好,对硫酸铵无机氮源利用最好,菌株BJQ-3抗生素抗性谱较窄,对30mgL-1的氯霉素有抗性,而对50mgL-1的链霉素、壮观霉素和庆大霉素、30mgL-1的四环素、100mgL-1的卡那霉素和氨苄霉素无抗性。系统研究了菌株BJQ-3对百菌清的降解特性,菌株BJQ-3不能利用百菌清为唯一碳源生长,但以非共代谢方式高效降解百菌清。菌株BJQ-3可以在48h降解95.6%的50mgL-1的百菌清,在20-40℃条件下对百菌清都有降解效果,35℃时降解效果最好;最适降解的pH值为6.0-7.0,pH低于5.0的酸性条件下不利于降解,pH8.0-9.0的偏碱性条件下降解良好;添加可选择性的碳、氮源可以促进百菌清降解,但非降解所必需,与共代谢降解机制不同。通过紫外扫描和高效液相色谱(HPLC)图谱比对和脱氯实验验证等方法,将百菌清的降解产物鉴定为羟基百菌清(CTN-OH),表明菌株BJQ-3能将百菌清的的一个氯原子脱除生成羟基。采用454高通量测序技术,研究百菌清长期污染和菌株BJQ-3修复百菌清污染土壤对细菌群落结构影响。研究发现,长期受百菌清污染的土壤中,变形菌门Proteobacteri、放线菌门Actinobacteria、硬壁菌门Firmicutes细菌比例增加,而酸杆菌门Actinobacteria、芽单胞菌门Gemmatimonadetes、浮霉菌门Planctomycetes、拟杆菌门Bacteroidetes、硝化螺旋菌门Nitrospira、Candidate division WS3、疣微菌门Verrucomicrobia.氰基细菌门Cyanobacteria比例显著降低,绿弯菌门Chloroflexi细菌变化不显著。接种7.45±0.55×107CFU g-1菌株BJQ-3到人为添加浓度为50mgkg-1的百菌清土壤中,30d可将百菌清降解到检测不出的水平。通过对土壤中细菌群落多样性分析,发现50mgkg-1干土的百菌清的施加会对土壤细菌多样性造成显著影响,百菌清的污染导致硝化细菌、蓝细菌门的细菌数量下降,而百菌清耐受性细菌比例上升,添加BJQ-3可部分恢复百菌清对细菌群落的影响。