荔枝落果相关组蛋白修饰因子(HMs)筛选及离层细胞质pH值染色观察

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荔枝起源于我国,是最具特色和优势的南方水果,具有重要的经济和营养价值。但其果实在生长发育过程中恰值南方梅雨季节,导致严重的生理落果和经济损失,这是荔枝产业中亟需解决的关键问题之一。前期的转录组测序发现大量的基因参与到荔枝落果,但这些基因又如何受到调控的还未知。作为一种重要的表观调控机制,组蛋白修饰对基因的转录起着重要作用。因此,本研究通过对荔枝基因组中组蛋白修饰因子的同源搜素,并结合生物信息学分析、异源转基因及qRT-PCR等技术,挖掘潜在的调控荔枝落果的组蛋白修饰因子;此外,本论文也对不同荔枝品种幼果脱落时的离层细胞质pH值做了探讨。主要研究结果如下:(1)鉴定出87个组蛋白修饰因子基因,包括6个组蛋白乙酰转移酶(HATs),11个组蛋白去乙酰化酶(HDACs),48个组蛋白甲基转移酶(HMTs)以及22个组蛋白去甲基化酶(HDMs)。(2)通过乙烯利处理和环剥去叶处理,比较分析了87个组蛋白修饰因子的基因表达情况,发现有17个基因的表达变化显著。根据其基因表达特征的变化,将其分为四类表达响应模式,分别为前期响应模式,中期响应模式、后期响应模式和全阶段响应模式。(3)选取3个表达差异显著的组蛋白去乙酰化酶基因构建了原核表达载体,其诱导蛋白具有组蛋白去乙酰化酶活性。(4)成功构建了7个表达差异显著的组蛋白的转基因载体,并获得了T2代转基因拟南芥植株种子。(5)随着果实脱落,离区细胞质的BCECF荧光信号增强,说明荔枝果实的脱落极有可能和离区细胞质的碱性化有关。
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