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[目 的]肝细胞肝癌（以下简称肝癌）是一种常见的恶性肿瘤,具有起病隐匿、治疗困难、复发率高、预后差等特点,每年发病率和死亡率都呈现上升趋势,大量基因组测序也揭示了肝癌有着巨大异质性,从而导致了在肝癌的诊断和治疗效果上存在着较大的差异,由此寻找出更多早期诊断以及治疗的分子靶标,是我们亟待解决的问题。文献报道TKs4在其他肿瘤中广泛表达,且与癌症的进程有关,但TKs4在肝癌中的表达情况研究甚少,TKs4在肝癌组织和正常组织中的表达差异及其功能尚不明确。本研究旨在分析TKs4在肝癌组织中的表达情况,并且初步研究TKs4在肝癌细胞中的相关功能机制,为肝癌的临床诊断和治疗提供更多的新思路。[方 法]1.收集昆明医科大学第二附属医院病理科89例肝癌患者组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组织化学实验方法检测TKs4蛋白表达情况,并且分析与其临床病理参数的关系;2.收集24例新鲜肝癌组织及相对应的正常肝组织标本提取总RNA,采用qRT-PCR方法检测TKs4基因mRNA的表达量;3.体外培养3种肝癌细胞系HepG2、Hep3B和HCCLM3及永生化人正常肝细胞系HL-7702,采用Western blot方法检测TKs4在四种细胞中蛋白表达量;4.体外实验慢病毒转染肝癌细胞系HepG2构建TKs4敲低细胞系,使用CCK8、流式细胞术和划痕实验观察TKs4敲低是否影响肝癌细胞的相关生物学行为。[结 果]1.89例肝癌组织中TKs4蛋白表达量（77221.056±50288.332）显著高于癌旁组织（26819.821±11801.387）（P<0.0001）;24例新鲜肝癌组织中TKs4基因mRNA的表达量（6.327±12.725）均显著高于相对应的正常肝组织（1.101±1.246）（P<0.01）。2.肝癌细胞系HepG2中TKs4蛋白表达量（0.228±0.048）、HCCLM3中TKs4蛋白表达量（0.879±0.112）均高于永生化人正常肝细胞系HL-7702蛋白表达量（0.170±0.023）（P<0.05,P<0.001）;肝癌细胞系 Hep3B中TKs4 蛋白表达量（0.261±0.094）亦高于永生化人正常肝细胞系HL-7702蛋白表达量（0.170±0.023）（P=0.16）,但差异无统计学意义。3.TKs4蛋白表达水平与肝癌组织学分级、TNM分期、AFP、KI-67及乙肝病史呈正相关（P<0.05）,但在不同性别、年龄、肿瘤大小、结节个数、MVI、CA125、CA199、卫星结节、肝纤维化、血管侵犯（影像）之间没有显著性差异（P>0.05）,TKs4低表达组患者的总体生存率和无复发生存率高于高表达组（P<0.05,P<0.05）,差异有统计学意义。4.单因素分析总体生存率结果显示,TKs4蛋白表达情况、患者的年龄、肿瘤大小、MVI、组织学分级、TNM分期、CA125、CA199是影响肝癌患者总体生存率的危险因素（P<0.05）;而性别、AFP、KI-67、乙肝病史、结节个数、卫星结节、肝纤维化、血管侵犯（影像）对肝癌患者总体生存率无明显影响（P>0.05）。5.多因素分析总体生存率结果显示:TKs4蛋白表达情况、TNM分期、CA125、CA199及MVI是影响肝癌患者总体生存率预后的独立危险因素（P<0.05）,而患者性别、年龄、肿瘤大小、结节个数、组织学分级、KI-67、乙肝病史、卫星结节、肝纤维化、血管侵犯（影像）不是影响肝癌患者总体生存率的独立危险因素（P>0.05）。6.单因素分析无复发生存率结果显示:TKs4蛋白表达情况、结节个数、TNM分期、AFP水平、卫星结节、CA125、CA199是影响肝癌患者无复发生存率的危险因素（P<0.05）;而性别、年龄、肿瘤大小、MVI、组织学分级、KI-67、乙肝病史、肝纤维化、血管侵犯（影像）对肝癌患者无复发生存率无明显影响（P>0.05）。7.多因素分析无复发生存率结果显示:TKs4蛋白的表达情况、AFP水平、结节个数及MVI是影响肝癌患者无复发生存率预后的独立危险因素（P<0.05）;患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、KI-67、CA125、CA199、乙肝病史、卫星结节、肝纤维化、血管侵犯（影像）不是影响肝癌患者无复发生存率预后的独立危险因素（P>0.05）。8.慢病毒转染肝癌细胞系后,下调TKs4实验组细胞的CCK8在450nm吸光度值在各个观察时间均低于对照组（P<0.05）;细胞自发凋亡实验结果显示下调TKs4的实验组细胞凋亡率高于对照组细胞（P<0.05）;细胞划痕实验显示,下调TKs4实验组在24h、48h的细胞迁移率均低于对照组（P<0.05）。[结论]1.TKs4蛋白在肝癌组织中高表达,可能参与肝癌发生发展过程。2.TKs4蛋白高表达与肝癌高组织学分级、高TNM分期、高水平AFP、KI-67高表达、乙肝阳性相关,较高水平的TKs4表达与肝癌患者较短的总生存率和无复发生存率显著相关。3.影响肝癌患者总生存率预后的因素有:年龄、肿瘤大小、MVI、组织学分级、TNM分期、CA125、CA199及TKs4蛋白在肝癌组织中的表达情况。其中TKs4蛋白的表达情况、TNM分期、CA125、CA199、MVI可作为肝癌患者总体生存率预后的独立危险因素。4.影响肝癌患者无复发生存率预后的因素有:结节个数、MVI、TNM分期、AFP水平、CA199、CA125及TKs4蛋白在肝癌中的表达情况。其中TKs4蛋白的表达情况、AFP水平、结节个数及MVI可作为肝癌患者无复发生存率预后的独立危险因素。5.TKs4可能成为评估肝癌患者预后的潜在分子标记物。6.下调TKs4基因抑制了肝癌细胞的增殖、迁移能力,促进了自发凋亡的生物学行为,提示TKs4可能参与肝癌细胞发生发展过程。