鼠MHC-Ⅰ类分子H-2K<'d>与HBV表位多肽复合物的结构解析和SARS-CoV特异CTL表位多肽的鉴定

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:llllgy
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  本论文研究鼠MHC-Ⅰ类分子H-2Kd与HBV核心抗原肽复合物的晶体结构。利用大肠杆菌表达系统和体外重折叠方法,制备了H-2Kd与其限制的表位多肽(SYVNTNMGL)组成的复合体,论表位多肽来源于乙肝病毒核心抗原87-95位。将该复合体进行结晶,获到空间组群为P21212的晶体,单晶参数为a=9.082,b=110.398,c=47.015A,α=β=γ=90°,X-射线衍射分辨率为2.0(A)。   本研究通过软件分析SARS-CoV的刺突蛋白(spike,S)和核衣壳蛋白(nucleocapsid,N),并选取十八条候选表位多肽,在体外通过重折叠实验进行初筛。利用HLA-A2的SARS恢复病人的外周血淋巴细胞(Peripheralbloodlymphocytes,PBLs)采用ELISPOT方法进一步筛选九条能与HLA-*A0201分子重折叠的候选多肽。发现在SARS恢复病人的外周血淋巴细胞中含有多肽P15特异的CTLs,这条多肽是一条10mer多肽(S411-420,KLPDDFMGCV),它位于刺突蛋白的S1结构域中ACE2受体结合区。它能刺激SARS恢复病人PBLs的CTLs分泌IFN-γ,P15也能显著提高T2细胞表面的HLA-*A0201分子的表达。在HLA-*A0201转基因鼠体内,P15能产生特异的CTLs。
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