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目的:通过组织病理学观察新西兰大白兔携带穿支血管网动脉化静脉皮瓣的微血管体积密度、血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)的表达及组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,探讨携带穿支血管网对动脉化静脉皮瓣血流灌注的影响。方法:选用6月龄的新西兰大白兔20只,以后肢内侧隐静脉为主干血管形成动脉化静脉皮瓣。采用随机分配原则,选择一侧后肢小腿内侧设计不携带穿支血管网动脉化静脉皮瓣为对照组(A组),另一侧后肢膝内侧设计携带穿支血管网的动脉化静脉皮瓣为实验组(B组)。分别于术后第3天、第7天切取A、B两组皮瓣5个区域25个点(四角及中央)组织标本,即刻福尔马林(10%)浸泡固定,组织标本HE染色和免疫组化技术处理,在显微镜下观察和测量组织标本微血管体积密度、CD31及组织VEGF的表达水平。通过SPSS22.0软件对实验获得的血管密度、CD31和VEGF的表达数据采用自身配对t检验,P<0.05为有统计学差异。结果:1.组织标本微血管密度MVD结果(采用免疫组化技术标记CD31表达水平来测量)本次实验应用免疫组织化学技术在200倍镜下通过测算A、B两组组织标本5个区域25个点的MVD值,取其均值。结果显示:在术后第3天,A组皮瓣MVD值均数为10.94±1.67,B组皮瓣MVD值均数为10.28±0.77,A组皮瓣MVD值高于B组,自身配对t检验统计量P>0.05,尚不能认为两组皮瓣术后第3天CD31标记测算的MVD值有差异;在术后第7天,A组皮瓣MVD值均数为20.70±3.18,B组皮瓣MVD值均数为15.61±1.02,A组皮瓣MVD值高于B组,自身配对t检验统计量P<0.01,认为两组皮瓣术后第7天CD31标记测算的MVD值差异有显著的统计学意义;A、B两组皮瓣术后第3至7天MVD均呈上升趋势,A组皮瓣MVD值上升程度为14.1±1.65,B组皮瓣MVD值上升程度为9.76±1.65,术后3至7天A组皮瓣MVD值上升值高于B组,自身配对t检验统计量P<0.01,认为两组皮瓣术后第3至7天CD31标记测算的MVD上升值差异有显著的统计学意义。2.皮瓣组织的VEGF表达情况应用免疫组织化学技术检测A、B两组皮瓣5个区域25个点获取VEGF的表达水平,取其均值。结果显示:在术后第3天,A组皮瓣的VEGF IOD值均数为12778.03±3097.71,B组皮瓣的VEGF IOD值均数为7862.53±2132.04,术后第3天A组皮瓣的VEGF IOD值高于B组皮瓣,自身配对t检验统计量P<0.01,认为两组皮瓣术后第3天VEGF IOD值差异有显著的统计学意义;在术后第7天时,A组皮瓣的VEGF IOD值均数为5624.88±2791.58,B组皮瓣的VEGF IOD值均数为2549.10±1346.77,术后第7天A组皮瓣的VEGF IOD值高于B组皮瓣,自身配对t检验统计量P<0.05,认为两组皮瓣术后第7天VEGF IOD值差异有统计学意义;在术后第3至7天两组皮瓣的VEGF IOD值均呈下降趋势,A组皮瓣的VEGF IOD下降值均数为7153.15±4994.48,B组皮瓣的VEGF IOD下降值均数为5313.42±2441.51,自身配对t检验统计量P>0.05,尚不能认为两组皮瓣术后第7天VEGF IOD值差异有统计学意义。3.皮瓣组织HE染色结果A、B两组皮瓣于术后第3天和第7天切取皮瓣5个区域的组织标本进行HE染色病理形态学分析,通过Leica Q 500MC显微图像分析系统计数测算皮瓣5个区域25个点组织标本内的微血管体积密度,取其均值。结果显示:在术后第3天,A组皮瓣的微血管体积密度均数为0.1056±0.0189mm~3/mm~3,B组皮瓣的微血管体积密度均数为0.2134±0.0407mm~3/mm~3,术后第3天A组皮瓣的微血管体积密度低于B组皮瓣,自身配对t检验统计量P<0.01,两组皮瓣术后第3天的微血管体积密度差异有统计学意义。术后第7天,A组皮瓣的微血管体积密度均数为0.4104±0.0776mm~3/mm~3,B组皮瓣的微血管体积密度均数为0.4053±0.0248mm~3/mm~3,术后第7天A组皮瓣的微血管体积密度稍高于B组皮瓣,自身配对t检验统计量P>0.05,两组皮瓣术后第7天的微血管体积密度差异无统计学意义。术后第3至7天,两组皮瓣的微血管体积密度均呈上升趋势,A组皮瓣的微血管体积密度上升值均数为0.3048±0.0634mm~3/mm~3,B组皮瓣为0.1919±0.0297mm~3/mm~3,上升程度A组>B组,自身配对t检验统计量P<0.01,两组皮瓣术后第3至7天微血管体积密度上升程度差异有显著的统计学意义。结论:1、通过组织病理学观察携带穿支血管网相比未携带穿支血管网动脉化静脉皮瓣的微血管体积密度高,说明携带穿支血管网皮瓣能有利于皮瓣血流灌注量的提高;2、免疫组化技术测量携带穿支血管网动脉化静脉皮瓣CD31和VEGF表达水平较低,提示携带穿支血管网动脉化静脉皮瓣能减轻动脉化静脉皮瓣的缺血缺氧。