弓形虫改良凝集试验的建立及我国部分地区犬、鸡弓形虫病流行病学调查

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弓形虫病是一种由弓形虫引起的、呈世界分布的人兽共患寄生虫疾病。弓形虫是一种细胞内寄生原虫,可感染人及所有温血动物,引发疾病甚至死亡。弓形虫病严重威胁人类健康,对畜牧业的发展也会造成巨大经济损失。目前,饲养犬的人群日益增多,鸡肉及其制品也是人类重要的食物来源,二者均为人感染弓形虫的传染源。因此,建立快速、准确的弓形虫检测方法、及时进行流行病学的调查分析对人类及动物的健康具有重大意义。血清学检测是诊断弓形虫常用的方法之一,其中改良凝集试验(MAT)因其简易、敏感性和特异性高的特点,被欧美国家广泛应用于人及动物弓形虫病的大规模血清流行病学调查和研究,而国内运用此方法的相关报道少见。本研究采用弓形虫RH株速殖子与S180小鼠肉瘤细胞共同接种昆明小鼠的方法制备了大量弓形虫速殖子,通过对弓形虫速殖子进行纯化、6%甲醛固定后终悬浮于pH8.9碱性缓冲液,并用0.2M β-巯基乙醇PBS稀释待测血清,提高了特异性和敏感性,从而建立了MAT检测弓形虫的方法,且用该方法对10份小鼠阴性弓形虫血清及20份家兔弓形虫阳性血清进行了检测,阴阳性符合率均达100%。用MAT对来自山东、江苏、湖南、湖北四省的925份犬血清和来自锦州市的610份鸡血清进行弓形虫病血清流行病学调查,并用间接血凝试验(IHAT)作为对照。结果显示,MAT、IHAT对犬的弓形虫病检出率分别为8.22%(76/925)、2.05%(19/925),二者差异极显著(P<0.01);MAT、IHAT对鸡的弓形虫病检出率分别为9.02%(55/610)、1.64%(10/610),二者差异极显著(P<0.01)。MAT对犬、鸡的弓形虫病流行病学调查显示:山东、江苏、湖南、湖北四省犬阳性率分别为13.5%(27/200)、2%(4/200)、1.54%(5/325)、20%(40/200);公犬与母犬血清阳性率分别为7.98%(36/451)和8.44%(40/474),性别之间感染无显著差异(P>0.05)。锦州市鸡血清阳性率为9.02%(55/610),其中散养鸡阳性率为18.75%(30/160),笼养鸡阳性率为5.56%(25/450),二者差异极显著(P<0.01);商品蛋鸡阳性率为7.89%(15/190),商品肉鸡阳性率为1.25%(2/160),种鸡阳性率为8%(8/100),三者之间差异显著(P<0.05)。本研究建立了改良MAT检测弓形虫的方法,并对我国部分地区的犬、鸡弓形虫病进行检测,为弓形虫病的血清流行病学调查提供了方法,并为各地区弓形虫病的防治工作提供了参考依据。
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