利用脱细胞角膜基质作为羟基磷灰石义眼座包裹材料的实验研究

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目的:利用反复冻融+电泳法制备脱细胞角膜基质,同时初步观察猪脱细胞角膜基质(APCS)作为羟基磷灰石(HA)义眼台包裹材料的可行性,为其在眼整形方面的临床应用提供理论和实验基础。方法:1、采用反复冻融+电泳法去除猪角膜细胞成分,制备脱细胞角膜基质(APCS),利用病理切片染色方法检查其细胞去除和细胞外基质结构保留情况,同时利用皮下植入法检测其生物相容性;2、将30只新西兰白兔随机分为A、B2组,每组15只,各组均将HA义眼台植入兔左眼眶内。A组为对照组,植入自体巩膜包裹的HA义眼台,B组植入APCS包裹的HA义眼台。术后每天肉眼和裂隙灯显微镜检查术眼,观测眼睑、结膜囊愈合情况及义眼台有无暴露,并分别于术后1周、2周、3周、4周、5周对每组兔均进行双眼增强磁共振扫描,同时两组各随机取出1只义眼台植入物行组织病理学检查,比较植入义眼台纤维血管化程度的差异。结果:1、新鲜猪角膜经过脱细胞进程处理,基质细胞已全部移除,细胞外基质构架保存良好(含前弹力层及前2/3基质层),免疫反应实验结果显示:皮下植入后第2周,APCS组织周边炎性细胞聚集明显,以中性粒细胞为主,植入后4周,实验组与对照组均未发现明显排斥反应, APCS组织中未见中性粒细胞及淋巴细胞浸润,周围包裹纤维结缔组织,与周边形成明显界限。2、术后1周,A、 B组均开始有不同程度的血管化,B组血管化速度缓慢,两组磁共振扫描结果有统计学差异(A、B组间p<0.05)。术后2周,两组血管化程度都提高,但均未完全血管化,B组血管化程度稍低于A组,两组之间血管化差异有统计学意义(A、B组间p<0.05)。术后3周,两组植入物血管化程度加深,较前有明显提高,但未完全血管化,两组之间的血管化无统计学差异(A、B组间p>0.05)。术后4周及以后, A、B两组均达到完全血管化,两组间无统计学差异。结论:1、利用反复冻融+电泳法能完全去除猪角膜基质细胞,同时良好保留细胞外基质,使其结构不受破坏。2、APCS对早期的HA义眼台血管化无显著影响,并未延缓羟基磷灰石义眼台完全血管化进程。3、利用APCS作为HA义眼台植入的包裹材料具有一定可行性。
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