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A型流感病毒属于正黏病毒科单股负链RNA病毒,其作为重要的呼吸道病原体,自20世纪以来全球范围内已发生多次流感大流行,对人类的健康、公共卫生及财产安全造成一定的影响。更令人担忧的是,人感染H5N1高致病性禽流感后,死亡率可高达60%左右,若一旦引起该种流感病毒的大范围流行,将会产生不可估量的损失。有研究者发现,高致病性禽流感感染机体产生强烈的细胞因子风暴,是导致宿主死亡的主要原因。SOCS家族在先天性免疫调节和获得性免疫调节中起到关键作用,并能够抑制细胞因子信号通路。本研究利用豚鼠作为模式动物,研究SOCS家族蛋白在调节细胞因子和抵抗流感病毒中所发挥的作用。首先,建立了SOCS家族蛋白荧光定量RT-PCR检测方法,分别通过相对定量和绝对定量方法验证了豚鼠体内SOCS家族感染H5N1流感病毒后基因的表达量。本实验分别设计了8对针对SOCS家族的荧光定量PCR引物,利用SYBR-Green染料方法,建立了检测方法,通过扩增曲线和溶解曲线进行分析,证明建立方法具有很好的特异性。进一步利用高致病性禽流感病毒H5N1通过滴鼻的方式感染豚鼠,感染后对豚鼠肺脏中的SOCSmRNA表达水平进行分析,检测到豚鼠在感染流感病毒后其体内SOCS1和SOCS3mRNA表达量显著升高。为了验证SOCS1和SOCS3对细胞因子的调节作用,我们分别构建了针对SOCS1和SOCS3的真核表达质粒及shRNA干扰质粒,分别转染豚鼠胚肺成纤维细胞(JH4)和豚鼠胚胎成纤维细胞(104Cl),体外水平验证感染H5N1流感病毒后其下游相关细胞因子和效应因子的表达情况,同时观察其对流感病毒复制能力的影响。研究结果显示,构建的过表达质粒和shRNA干扰质粒具有明显的上调和抑制SOCS1、SOCS3的作用,但其对于细胞因子的调节作用和病毒复制能力的影响不显著,明显的区别于其它人报道的SOCS1和SOCS3的免疫调节作用,表明SOCS蛋白家族对流感病毒诱导的细胞因子的调节作用具有一定的种属特异性。本研究的结果阐述了豚鼠SOCS家族蛋白在流感病毒感染中所发挥的作用,为进一步研究豚鼠抗流感病毒的分子机制奠定了一定基础。