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随着全球水资源缺乏及土壤与淡水盐渍化加剧,干旱、高盐等非生物逆境已经成为影响作物生长发育的主要因素,严重影响了作物的产量。因此利用转基因技术提高作物的逆境性是主要的育种手段之一。在分子育种中,候选基因的筛选及功能的准确鉴定决定了后期分子育种工作的成败。转录因子作为一类抗逆候选基因在分子育种的成功应用已有诸多报道,所以通过系统研究新一类转录因子家族基因功能,发掘新的抗逆候选基因对于培育抗逆作物品种具有重要意义。NF-Y转录因子广泛存在与真核生物中,是由NF-YA、NF-YB和NFYC三个亚基组成的异源三聚体。NF-Y转录因子在植物抗逆胁迫过程中发挥着重要作用。本研究对大豆NF-YC家族基因进行全基因组鉴定,并对GmNF-YC6和谷子SiF-box18的功能进行了分析。1、大豆NF-YC家族基因的全基因组鉴定与分析:大豆NF-YC家族中有25个成员,聚类分析将其划分为4类,同一类基因具有相似的内含子-外显子结构,染色体定位分析发现,这些基因分别分布在大豆的14条染色体上,13号染色体上分布的基因最多;启动子元件分析表明,大豆25个NF-YC基因均含有MYB和MYC元件,说明这些基因对干旱应答反应可能主要是受MYB、MYC转录因子调控。RT-PCR分析显示,GmNF-YC家族对ABA没有响应,在干旱处理下GmNF-YC6的相对表达量最高。2、GmNF-YC6的功能验证:通过Real-time PCR检测GmNF-YC6下游基因的相对表达量,结果表明COR15A、COR47、RD29A和Kin1在转基因株系中的相对表达量明显高于野生型;在6%PEG处理下,转基因株系的总根长明显长于野生型植株;在干旱处理下,转基因株系的存活率明显高于野生型;生理指标的测定表明,干旱条件下,转基因植株的MDA含量降低,POD和CAT的活性增强,这说明可以增强植株的抗旱性。通过酵母双杂系统,筛选出了 2个与抗逆相关的基因;亚细胞定位结果显示,GmNF-YC6蛋白定位在细胞核与细胞膜中。3、SiF-box18的功能分析:启动子元件分析表明,SiF-box8基因含有多种逆境应答元件。Real-timePCR分析显示,SiF-box18基因对干旱、高盐、ABA、SA和JA都有响应;亚细胞定位结果显示,SiF-box18定位在细胞核中。综上,本研究对大豆GmNF-YC进行全基因组鉴定,并对GmNF-YC6和谷子SiF-box18基因进行了功能分析,为进一步研究NF-YC家族基因和谷子F-boχ18的功能提供了参考。同时,也为研究GmNF-YC6的抗旱机制提供依据。