玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63对设施番茄连作障碍的修复

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由于设施蔬菜种类单一化和连续种植,使其连作障碍发生日益严重,这一问题极大的制约了设施蔬菜生产的发展。本试验以设施番茄为研究对象,分别应用玫瑰黄链霉菌(Stremptomyces roseoflavus) Men-myco-93-63的固体、液体两种发酵物对番茄连作障碍的修复作用进行了研究,内容包括Men-myco-93-63在土壤中检测方法的确立及其根际定殖的检测;该生防菌对番茄植株促生作用的试验;盆栽试验研究Men-myco-93-63对连作土壤的修复机理,即土壤微生物结构及数量的变化,土壤中酚酸物质的降解,土传病原菌数量的检测,土壤基础理化性质的变化,及对连作障碍的防治程度;通过田间试验,明确玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的固体、液体发酵物的最适使用剂量。主要结果如下:1.选用腐霉利、多菌灵、甲基托布津、利福平、青霉素、链霉素、泰乐菌素、重铬酸钾等8种常用抗生素或杀菌剂,通过抗药性标记试验,建立了玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的抗药性标记,即确定了重铬酸钾(0.06 g/L)/青霉素(0.20 g/L)为适合检测该生防菌的标记药剂及浓度。通过获得的抗药性标记,结合菌落形态和16S rDNA序列分析,能够准确的检测出玫瑰黄链霉菌在土壤中的定殖情况。利用此方法,检测了Men-myco-93-63在番茄根际土壤中的定殖,结果表明,该生防菌在番茄根际土壤中能够定殖,接菌15 d后定殖量达到最高,为5.6×10~5 cfu/g,之后下降,到30 d后检测不到Men-myco-93-63菌株的存在。另外,Men-myco-93-63的固体发酵物与土壤体积比为1:400混合时,对番茄苗期的生长有促进作用。2.检测了河北邢台番茄种植基地不同连作年限土壤中酚酸的种类和含量,在连作土壤中检测到了3种酚酸,即对羟基苯甲酸、香草酸和阿魏酸,其中5年连作土壤中的酚酸总含量为10.50 mg/kg,而10年连作土壤中的酚酸总含量为16.08 mg/kg。应用3种酚酸的混合液,研究了酚酸对番茄种子萌发的抑制,结果发现当浓度达0.20 g/L时,明显抑制和延缓了种子的萌发。Men-myco-93-63对酚酸的耐受性很强,当3种酚酸混合液总浓度为0.60 g/L,才对菌株具有明显的抑制作用。Men-myco-93-63菌株对酚酸的降解作用较弱,对3种酚酸的降解率分别为7.00 %、6.38 %和6.61 %。应用Men-myco-93-63的固体发酵物对酚酸土壤进行处理后,番茄幼苗的株高、根长及干重与对照组有明显差异。3.利用盆栽试验,研究了Men-myco-93-63对番茄连作土壤的修复作用,结果表明, Men-myco-93-63对连作土壤的微生态环境具有改善作用,土壤中的微生物总量有所提高,与对照相比,土壤中细菌和放线菌数量增加,真菌总量有所减少,其中镰刀属真菌数量明显下降,说明Men-myco-93-63的施用一定程度上改善了土壤微生物的结构。Men-myco-93-63不同发酵物对番茄生长均有促进作用,其中发酵液处理对连作障碍的防治率达26.36 %,固体发酵物对连作障碍的防治率为47.37 %。在大棚试验中,发酵物不同的用量对番茄植株生长的影响有明显差异,Men-myco-93-63发酵原液稀释40倍时,植株茎粗平均值达到1.56 cm,株高平均值达95.06 cm,每亩施用367 kg固体发酵物时,植株茎粗平均值达到1.54 cm,株高平均值达94.25cm,而对照组的植株茎粗平均值为1.34 cm,株高平均值达82.38 cm,它们对连作障碍的防效为44.11%和51.97%,明显的优于其他处理。
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