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生物能源的开发利用是缓解全球能源压力,保障能源安全的重要途径。其中生物柴油以其较高的可持续性和清洁无污染的特点成为全球关注的焦点。微藻具有油脂含量高,生物量大,生长周期短,易培养等特点,是制备生物柴油的良好资源。本研究旨在通过筛选藻种和诱变选育获得脂类含量高,生长快的微藻,并优化培养条件和培养方式,为微藻生物柴油的大规模生产提供理论基础和技术支持。主要研究结果如下:1)研究表明,对实验室现有藻种和野外采集到的四种底栖硅藻进行总脂含量测定,筛选获得了如下高脂微藻:三角褐指藻(Pheaodactylum tricornutum),总脂含量34.4%;牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri),总脂含量25.1%;旋链角毛藻(Chaetoceros curvisetus),总脂含量24.2%;假微型海链藻(Thalassiosirapseudonana),总脂含量24.3%;盐生舟形藻(Navicula halophila),总脂含量39.1%;碎片菱形藻共生变种(Nitzschia frustulum var.symbiotica),总脂含量35.7%。其中,两种底栖油泥硅藻,盐生舟形藻和碎片菱形藻共生变种总脂含量较高。2)以Nile Red为染料,对假微型海链藻进行荧光染色并测定荧光强度,通过对比标准物得出油脂含量。优化后的最佳染色条件为Nile Red浓度0.5μg/mL,染色时间10min,染色温度40℃,藻液OD680的范围为0.1~0.4。结果表明,优化后的方法可准确测定假微型海链藻和牟氏角毛藻的中性脂含量,但对三角褐指藻效果不佳。3)采用紫外线照射法对假微型海链藻进行诱变处理,分别通过Nile Red荧光法和油脂提取称重法完成初筛和复筛。获得的7株突变株中,HL-1突变株的总脂含量比出发株提高原含量的19.3%,生长速率低于出发株,但生物量高于出发株。4)在此基础上,通过正交试验,发现了两种微藻的最适生长条件和最适产油条件。其中,三角褐指藻的最适生长和产脂条件分别为光照4500lx,温度17℃,NO3-浓度2mmol/L,EDTA-Fe浓度10-4mmol/L和光照3000lx,温度22℃,NO3-浓度0.5mmol/L,EDTA-Fe浓度10-6mmol/L。牟氏角毛藻的最适生长和最适产脂条件分别为光照6000lx,温度27℃,NO3-浓度2mmol/L,EDTA-Fe浓度10-6mmol/L和光照3000lx,温度17℃,NO3-浓度1mmol/L,EDTA-Fe浓度10-5mmol/L。5)以从各种高脂微藻中提取的油脂作为原材料,制备生物柴油,产量为干重的5.6~15.3%。其中,盐生舟形藻和碎片菱形藻共生变种的生物柴油产量高于另三株高脂硅藻,分别为15.3%和14.3%。