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【研究背景】脉络膜新生血管(CNV)是许多视网膜和脉络膜疾病的共同病理表现,常见CNV疾病包括年龄相关性黄斑变性(AMD)、特发性脉络膜新生血管、眼组织胞浆菌病综合征(POHS),以及眼底血管样条纹(AS)、病理性近视和外伤性脉络膜破裂等。新生血管从脉络膜长出后突破Bruch膜后长入视网膜色素上皮下间隙或神经上皮下,由于新生血管是不成熟的,易发生出血和渗漏等改变,继而形成瘢痕,造成局部损伤,这些损伤好发于黄斑区,对中心视力影响较大,因此CNV是造成视力丧失的重要原因之一。CNV的发生和发展是复杂的过程,受多种因素和因子精细而敏感的调控。血管内皮生长因子(VEGF)是目前已知的最强促血管生成因子,能够诱导新生血管生成并使血管通透性增高。抗VEGF治疗也是目前主流的CNV治疗方式。本研究组已证实Notch信号通路同样在CNV的生成中起重要作用,Notch信号通路中的Delta样配体4(Dll4)基因是除VEGF外目前发现的另一可因半剂量等位基因缺失而使动物在胚胎时期死亡的基因,Dll4在血管的发生发展中起重要作用。探讨Dll4在CNV的发生中可能的作用及其机制,可以为临床防治CNV相关疾病提供新的思路。【目的】探讨Notch信号通路中Dll4在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管生成中的作用机制。【方法】将120只BN大鼠随机分为正常组(18只)、光凝组(54只)、光凝后实验组(24只)和光凝后对照组(24只)。532nm激光诱导建立双眼CNV模型。实验组在光凝后立刻玻璃体内注射25mg.mL-1的VEGF抗体Avastin 10 L,对照组在光凝后注射0.01mmol.L-1 PBS10 L。采用免疫荧光染色法检测7d时Dll4和VEGF在正常组(6只)和光凝组(6只)CNV中的表达。采用Western-blotting和RT-PCR方法检测正常组(12只)和光凝后1d(12只)、3 d(12只)、7 d(12只)和14 d(12只)组CNV中Dll4和VEGF的蛋白和mRNA表达趋势。7 d时采用Westernblotting和RT-PCR检测实验组(12只)和对照组(12只)CNV中Dll4和VEGF蛋白及mRNA表达含量的差异,14 d时通过组织切片HE染色和脉络膜铺片法检测实验组(12只)和对照组(12只)CNV生成的厚度和面积。【结果】Dll4和VEGF在CNV区域有共表达。Dll4和VEGF蛋白和mRNA的表达趋势一致,均在第一天表达开始上升,第7天时达到高峰,第14天时开始下降。玻璃体内注射Avastin后,VEGF和Dll4表达均下降(P<0.05),实验组CNV面积(24202±2608 m2,n=8)较对照组(37226±3208 m2,n=10)明显减小(P<0.01),实验组CNV厚度(53.68±5.89 m,n=9)较对照组(82.86±7.46 m,n=11)明显降低(P<0.01)。【结论】Dll4在CNV生成中具有一定作用,可能参与了VEGF调控CNV生成的过程。