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食品中的真菌毒素污染会严重危害人类的身体健康,因此发展简便、快捷、灵敏、现场化的真菌毒素检测方法,已成为食品安全部门和相关科研工作者共同关注的重要课题。本论文设计构建了几种成本低廉、不需要复杂的仪器等优点的石墨烯基可视化生物传感平台,并考察了其检测真菌毒素的应用研究。具体内容如下:(1)利用π-π吸附作用将设计的单链DNA1和变色染料酚酞(PP)同时负载在氧化石墨烯(GO)表面,得到探针PP-DNA1-GO;以共沉淀法制备的磁性氧化石墨烯纳米材料(Fe3O4/GO)为载体负载设计的单链DNA2,得到探针DNA2-Fe3O4/GO;进一步利用赭曲霉素A适配体(OTA aptamer)会分别与DNA1、DNA2部分互补杂交,构建了检测OTA的PP-DNA1-GO-OTA aptamer-DNA2-Fe3O4/GO比色传感平台;基于OTA aptamer特异性识别、磁分离和调节上清液pH释放PP检测OTA。在优化条件下,OTA的线性范围为10-250ng·mL-1,且可用肉眼识别颜色变化。按照OTA比色传感平台设计原理,如以黄曲霉毒素B1(AFB1)aptamer和它的半互补链(DNA3和DNA 4)为探针,百里酚酞(TP)为信号分子,利用同样原理可实现AFB1可视化检测。更为重要的是,将构建的OTA和AFB1两种比色传感平台结合,在碱性条件下可实现同一样品中的OTA和AFB1的同时可视化检测。因此这种比色传感平台设计原理是通用型的,更换变色染料、真菌毒素aptamer和它的半互补链,可以实现其他相应真菌毒素的检测。(2)按照(1)中通用型比色传感平台设计原理和构建方法,增加了pH参数作为控制条件,进一步构建了可以同时检测四个目标物的pH分辨可视化传感平台。筛选了四种市售的、pH敏感区间差异大的变色染料分子PP、TP、孔雀石绿(MGCB)和甲基紫(MV)为信号分子,通过调节传感体系的pH值控制不同染料间显色的相互干扰,在酸性条件下释放和采集MGCB和MV,在碱性条件下释放和采集PP和TP;如分别在酸性条件下释放和采集MGCB检测AFB1,如在碱性条件下释放和采集PP检测OTA,其线性范围分别为10-200 ng·mL-1和5-250 ng·mL-1。更为重要的是,所构建的pH分辨比色传感平台能够实现同时对四个目标物OTA和伏马毒素B1(FB1),AFB1和微囊藻毒素LR(MC-LR)的可视化检测。(3)以TP为信号分子,构建检测AFB1的TP-DNA1-GO-AFB1 aptamer-DNA 2-Fe3O4/GO新型比色传感平台;以制备的金纳米(Au NPs)为类过氧化物酶,Fe3O4@Au为载体和磁分离剂,TMB为信号分子,利用OTA aptamer及其互补链(C OTA aptamer)构建检测OTA的Au NPs-OTA aptamer-Fe3O4@Au-COTA aptamer比色传感平台。基于磁分离后,上清液中Au NPs在酸性条件下催化TMB显色检测OTA,磁分离的固体在碱性条件下释放TP检测AFB1,由于两个传感体系互不干扰,从而实现同时可视化检测OTA和AFB1。在优化条件下,OTA的范围线性为0.5-80 ng·mL-1,AFB1的范围线性为5-250ng·mL-1,该检测方法可用于花生实际样品的检测。