成年裸鼠和成人体表皮肤的比较组织形态学研究

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研究背景裸鼠作为一种特殊的模式动物广泛应用于诸如免疫、肿瘤、移植等研究领域。裸鼠胸腺免疫缺陷,体表无茸密鼠毛,类似正常成人体表皮肤外观,是异种异体皮肤移植的理想受体。但是与人类皮肤相比,裸鼠皮肤又有其自身的组织学特点。因此,对裸鼠皮肤的组织学结构进行深入观察研究,并将其与成人体表皮肤的组织学作一比较显得必要,为相关研究受试前后的研究结果提供可靠的参照,并促使研究成果更好的向临床转化。然而,目前缺少选取裸鼠皮肤为比较对象的组织学报道;前人以皮肤为对象的比较组织学研究多侧重不同纲、目间的横向比较,其中涉及鼠与人皮肤的形态学差异描述较为笼统,并未见细致的报道;且这些研究多从纯生物学角度进行比较,忽略了比较组织学在转化医学方面的价值。本研究选取正常成年裸鼠皮肤与正常成人体表皮肤作一组织学比较,为皮肤病学和肿瘤学领域的研究提供客观有效的组织学依据。研究目的本实验取健康成年裸鼠(8w,BALB/c-nu,雌雄不限)及成人正常皮肤,对二者进行苏木精-伊红染色、Masson-Fontana染色以及透射电子显微镜检查,观察裸鼠皮肤和成人皮肤全层组织学结构、黑色素的分布及表皮基底层黑色素细胞的情况,对实验结果进行分析评价,探讨比较成年裸鼠皮肤和成人体表皮肤组织学结构,为相关领域的研究结果提供可靠的参照,促使其向临床转化。研究方法。1、苏木精-伊红染色取裸鼠背部及成人胸部全层皮肤,用10%福尔马林溶液固定24小时,经脱水、透明、石蜡包埋后制成4μm石蜡切片,常规脱蜡至水后行苏木素-伊红染色,光镜下观察全层皮肤的一般结构。2、Masson-Fontana染色取裸鼠背部及成人胸部全层皮肤,用10%福尔马林溶液固定24小时,经脱水、透明、石蜡包埋后制成4μm石蜡切片,脱蜡至水后行Masson-Fontana染色,光镜下观察黑色素分布情况。3、透射电子显微镜检查取裸鼠新鲜皮肤置于2.5%戊二醛溶液固定12小时。常规用丙酮/环氧树脂包埋制成500的切片,醋酸铀和柠檬酸铅染色,透射电子显微镜观察黑色素细胞。结果HE染色可见成人全层皮肤明显厚于裸鼠;裸鼠的表皮与真皮接壤处平坦,而成人的表皮与真皮接壤处形成表皮嵴及真皮乳头;裸鼠表皮颗粒层不清晰,成人表皮颗粒层多由一层颗粒细胞构成;成人表皮基底层可见个别细胞胞质内含浅棕色颗粒,而裸鼠未见。成人具有完整汗腺结构,裸鼠汗腺缺如。成人皮脂腺明显比裸鼠发达,腺细胞较成熟;裸鼠皮脂腺不发达,腺细胞可见双核。成人毛囊一侧可见明显立毛肌,裸鼠未见明显立毛肌结构。裸鼠皮下组织中可见一层横纹肌,这在人皮下组织中未见。Masson-Fontana染色显示人皮肤基底层棕黑色颗粒带,为阳性结果;而裸鼠皮肤为阴性结果。透射电镜观察裸鼠皮肤基底层可见黑色素细胞及黑素小体,其形态特点与电镜下人皮肤基底层黑色素细胞及黑素小体相一致。结论裸鼠皮肤和成人皮肤光镜组织学结构存在差异:裸鼠皮肤薄于成人,几乎不形成表皮嵴和真皮乳头;成人皮脂腺较裸鼠分化成熟;裸鼠汗腺缺如,皮下具有薄层横纹肌。Masson-Fontana银染法显示裸鼠皮肤黑色素分布为阴性结果,而透射电镜下可以在基底层发现黑色素细胞。
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