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研究目的本研究以选用寒凝证类痛经模型大鼠为研究对象,根据现代医学对于原发性痛经发病机制的认识,以胞宫相关经穴(三阴交穴、关元穴)为切入点,比较针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠扭体反应、子宫微循环、子宫组织内前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)含量以及PGF2α/PGE2比值、前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2) mRNA表达、MLCK的影响,初步探讨针刺缓解胞宫疼痛的作用机制,同时探讨针刺不同穴位的镇痛效应差异。研究方法将72只SD雌性大鼠随机分为:盐水组、寒凝证类痛经模型组、针刺三阴交组、针刺关元组,每组18只。除盐水组外,其余各组大鼠予注射苯甲酸雌二醇和缩宫素,且第1-5d每日在给药后放入-25℃冰柜冷冻4小时制备寒凝证类痛经大鼠模型;盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。观察20min内扭体反应的潜伏期、扭体次数及扭体评分;观测各组大鼠5、10、20min子宫微循环变化;采用ELISA法检测大鼠子宫组织内前列腺素F2。(PGF2。)、前列腺素E2(PGE2)含量;采用RT-PCR法检测大鼠子宫组织内PGF2。、PGE2mRNA表达水平;采用ELISA法检测大鼠子宫内平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)含量。研究结果1针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠扭体反应的影响与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组扭体潜伏期明显缩短,扭体次数及扭体评分显著增高,统计学有显著性差异(P<0.01)。与寒凝证类痛经模型组相比,针刺三阴交组扭体潜伏期明显延长,扭体次数及扭体评分明显降低,统计学有显著性差异(P<0.01);针刺关元组扭体潜伏期明显延长,扭体次数及扭体评分明显降低,有统计学差异(P<0.05)。针刺组之间相比,扭体潜伏期、扭体次数及扭体评分,差异均无统计学意义(P>0. 05)。2针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠子宫微循环的影响与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组微血管、cap管径明显收缩,cap条数明显减少,微血管清晰度明显下降,微血管颜色明显加深,血流明显减慢或停止,统计学有显著性差异(P<0. 01)。与寒凝证类痛经模型组相比,针刺三阴交组各时间段大鼠子宫微血管明显扩张,有统计学差异(P<0.05, P<0.01), cap管径明显扩张,有统计学差异(P<0.05, P<0.01,P<0.05),微血管清晰度明显改善,有统计学差异(P<0.05,P<0. 01),微血管颜色明显改善,有统计学差异(P<0. 05,P<0. 01),血流明显加快,统计学有显著性差异(P<0.01);针刺关元组10mmin时,微血管管径明显扩张,有统计学差异(P<0.05),各时间段微血管清晰度明显改善,有统计学差异(P<0. 05, P<0. 01,P<0. 05),10min时微血管颜色明显改善,有统计学差异(P<0. 05),5min时血流明显加快,统计学有显著性差异(P<0. 01)。针刺组之间相比,针刺三阴交组10、20min时较针刺关元组子宫徽血管管径明显扩张,统计学有显著性差异(P<0.01),针刺三阴交组5、10min时较针刺关元组cap管径明显扩张,有统计学差异(P<0. 05),针刺三阴交组10、20min时较针刺关元组微血管颜色明显改善,有统计学差异(P<0. 05, P<0.01),针刺三阴交组10、20min时较针刺关元组血流明显加快,统计学有显著性差异(P<0. 01) 。3针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠子宫前列腺素的影响3. 1针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠子宫前列腺素F2 α、前列腺素E2含量及其二者比值的影响与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组大鼠子宫组织中PGF2α含量、PGE2/PGF2α比值明显升高,统计学有显著性差异(P<0. 01)。与寒凝证类痛经模型组相比,针刺关元组大鼠子宫组织中PGF2α含量、PGE2/PGF2α比值明显降低,统计学有显著性差异(P<0. 01)。针刺组之间相比,针刺关元组大鼠子宫组织中PGF2α含量、PGE2/PGF2α比值较针刺三阴交组明显降低,有统计学差异(P<0. 05,P<0. 01)。3.2针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠前列腺素F2α、前列腺素E2mRNA表达及其二者比值的影响与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组大鼠子宫组织中PGF2α、PGE2mRNA表达明显升高(P<0.01)。与寒凝证类痛经模型组相比,针刺三阴交组大鼠子宫组织中PGF2α mRNA表达明显降低,有统计学差异(P<0. 05);针刺三阴交组、针刺关元组大鼠子宫组织中PGE2mRNA表达明显降低,有统计学差异(P<0.05,P<0. 01)。针刺组之间相比,大鼠子宫组织中PGF2 α、PGE2 mRNA表达及PGF2 α /PGE2比值变化不明显(P>0. 05)。4针刺不同穴位对寒凝证类痛经大鼠子宫组织内MLCK的影响与盐水组相比,寒凝证类痛经模型组大鼠子宫组织中MLCK含量明显升高(P<0. 01) 。与寒凝证类痛经模型组相比,各针刺组大鼠子宫组织中MLCK含量变化不明显(P>0. 05)。针刺组之间相比,大鼠子宫组织中MLCK含量变化不明显(P>0.05)。研究结论1 寒凝模型结合类痛经模型的制备方法,成功建立了寒凝证类痛经动物模型。2 针刺三阴交、关元二穴可缓解模型大鼠的类痛经反应。3 针刺三阴交、关元二穴可明显改善模型大鼠的子宫微循环状态。4推测针刺可能是通过调节子宫平滑肌舒缩物质,进而缓解子宫平滑肌的痉挛状态。5不同穴位具有不同的镇痛作用。三阴交穴较关元穴镇痛效应明显。综上所述,原发性痛经伴有神经内分泌水平的紊乱及子宫微循环功能障碍,是其发病的部分机制。针刺对PD的治疗效应的部分机制是通过调节机体子宫组织内前列腺素的水平紊乱,改善子宫局部微循环功能障碍、缓解疼痛的目的。而且与二穴比较,其胞宫的调节效应不同,三阴交穴的各项指标均明显,说明三阴交穴具有调控胞宫的效应特异性,该特异性是相对的。