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目的:研究STGC3基因高表达,对鼻咽癌CNE2细胞系自噬的影响,并探讨其可能的分子机制,为进一步阐明STGC3基因在鼻咽癌发病中的作用及分子机制提供新的实验依据。方法:运用慢病毒表达载体系统,建立STGC3基因稳定高表达的CNE2细胞系,通过荧光显微镜观察转染细胞红色荧光蛋白表达,qRT-PCR技术,检测STGC3 mRNA水平,实验确定转染效率;qRT-PCR及Western Blot方法,检测自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I、p62蛋白水平的变化;GFP-LC3瞬时转染CNE2细胞,激光共聚焦显微镜观察自噬体的形成;Western Blot方法,检测p-S6、p-ULK1蛋白水平变化。结果:表达载体经DNA测序鉴定,结果表明STGC3高表达慢病毒载体RTP-h STGC3-his成功构建;将空载体(RTP-his)和RTP-h STGC3-his分别转染至CNE2细胞,荧光显微镜下可见RFP表达的红色荧光,证明RTP-his和RTP-h STGC3-his成功导入CNE2细胞;qRT-PCR方法,检测结果显示,RTP-h STGC3-his载体转染CNE2,CNE2细胞系恢复STGC3基因表达,成功建立STGC3基因稳定高表达的CNE2细胞(CNE2-RTP-h STGC3-his);CNE2-RTP-h STGC3-his和CNE2-RTP-his细胞,经无糖d-Hanks饥饿处理4h,分为实验组及阴性对照组,CNE2-RTP-his未经饥饿处理作为空白对照组,qRT-PCR和Western Blot检测结果显示,阴性对照组CNE2-RTP-his细胞中LC3mRNA表达上调,LC3-II/LC3-I比值升高,p62表达水平降低(P<0.01);实验组CNE2-RTP-h STGC3-his细胞中LC3 mRNA表达下调,LC3-II/LC3-I比值降低,p62表达水平升高(P<0.01)。瞬时转染LC3-GFP融合蛋白并予以饥饿处理,共聚焦显微镜可见阴性对照组CNE2-RTP-his细胞中绿色荧光斑点增多,而实验组CNE2-RTP-h STGC3-his细胞中绿色荧光斑点减少(P<0.01),表明实验组细胞自噬体的形成被抑制;Western Blot检测结果显示:饥饿处理,阴性对照组CNE2-RTP-his细胞中p-S6和p-ULK1表达下调,而实验组CNE2-RTP-h STGC3-his细胞中p-S6和p-ULK1表达上调(P<0.01)。结论:1.上调STGC3基因在CNE2细胞的表达,可抑制饥饿诱导的CNE2细胞自噬。2.STGC3基因在CNE2细胞高表达,可通过激活m TOR通路,抑制饥饿诱导的CNE2细胞自噬。