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目的:明确蛋白酶Nexin-1(PN-1)在结肠癌中的表达情况及其与Sonic Hedgehog(SHH)的关系。方法:用慢病毒包装BRAF-V600E质粒和空载体(vector)质粒并感染结肠黏膜上皮细胞NCM460,经嘌呤霉素筛选出稳定表达BRAF突变和空载体的细胞(分别记为NCM460-BRAFV600E细胞和NCM460-vector细胞),然后采用western blot检测BRAF-V600E蛋白及其下游的p-MEK蛋白表达情况以确认转录成功,之后采用荧光定量PCR检测PN-1、SHH和GLI1在两组细胞中的相对表达量。采用荧光定量PCR检测PN-1和SHH在五组结肠癌细胞系(RKO,HT29,HCT116,SW480,LOVO)中的相对表达量;选择PN-1表达最高和最低的细胞系分别沉默和过表达PN-1,并检测SHH的表达水平变化。在人结肠癌组织及癌旁组织中采用免疫组织化学方法检测PN-1、SHH的表达情况并分析。结果:NCM460-BRAFV600E细胞比NCM460-vector细胞和空白对照组NCM460细胞BRAF、p-MEK表达明显升高,表明转染成功。NCM460-BRAFV600E细胞比NCM460-vector细胞中PN-1表达明显升高(P<0.05),而SHH及GLI1则明显表达降低(P<0.05)。五组结肠癌细胞系中PN-1和SHH均有不同程度的表达,PN-1表达最高的是LOVO,最低的是RKO;SHH则与之相反。在LOVO中采用si RNA沉默PN-1的表达会使SHH表达明显上调(P<0.05),在RKO中过表达PN-1则会使SHH表达下调。在人结肠癌中PN-1表达量明显高于癌旁组织(P<0.05);SHH在癌组织中表达较癌旁组织中高,但差别并无统计意义。结论:PN-1在结肠癌细胞系中抑制SHH的表达,在人结肠癌组织中二者关系仍需进一步研究。