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重金属铬在皮革、印染、纺织和有机合成等工业中用途广泛,产生的Cr(Ⅵ)直接排放到环境中会对区域水体和生态系统造成严重污染甚至危害人类健康。本文针对真菌去除水体中Cr(Ⅵ)污染技术做系统研究。利用Cr(Ⅵ)作为特定的筛选剂,采用逐级驯化的方法,从东北林业大学实验林场土壤中筛选分离出一株耐受Cr(Ⅵ)真菌,命名为BSLO1。菌株BSLO1基质白色,菌丝绒毛状,显微结构具有明显且密集的分支,有隔,细胞核不清晰,菌丝直径为2-3μm。该菌株的特异性ITS基因片段长度为571 bp,分子生物学鉴定BSLO1与钩状木霉Trichoderma hamatum同源性达到99.5%。综合其菌落形态、菌丝形态及分子生物学结果,筛选的菌株鉴定为7Trichoderma hamatum。Cr(Ⅵ)对BSLO1最小抑菌浓度为500 mg/L,高于己报道过的其它木霉属真菌。30℃,pH值9.0,是真菌BSLO1最适宜生长条件,去除Cr(Ⅵ)效率达到90%。通过测定菌体和培养液中Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)含量,确定BSLO1以生物还原形式去除86.4%的Cr(Ⅵ),生物吸附和生物吸收形式去除8.13%的Cr(Ⅵ)。pH值7.0-9.0时,BSLO1对Cr(Ⅵ)去除率达到90%以上,25-35℃,Cr(Ⅵ)去除率达到94.53%。Cr(Ⅵ)对BSLO1细胞形态有影响,在200mg/L-500mg/LCr(Ⅵ)浓度下,BSLO1菌丝体表面粗糙,菌丝黏连,孢子表面褶皱,粗糙,有聚集现象。通过包埋剂PVA-SA和PVA-SA-PDA制备两种BSLO1孢子固定化小球,显微观察证实固定化小球内孢子可以萌发生长形成菌丝。PVA-SA固定BSLO1小球对Cr(Ⅵ)去除效率为93.4%,重复利用18次之后,固定化小球裂解,菌体泄露;通过PVA-SA-PDA固定BSLO1孢子小球去除Cr(Ⅵ)效率为97.2%,可以重复利用23次,且小球机械性能比较稳定,没有出现裂解、菌体泄露现象。两种固定化小球从第8个循环开始,三天可以完全去除50 mg/L浓度的Cr(Ⅵ),接近游离菌体去除Cr(Ⅵ)效率的2倍。BSLO1在Cr(Ⅵ)胁迫下,细胞中ROS(活性氧)含量增加。对比BSLO1和另一株非耐受Cr(Ⅵ)真菌BCZO4细胞中抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性,发现Cr(Ⅵ)浓度超过100 mg/L时,BSLO1细胞中SOD活性增强65.8 U/g,POD活性增强93 U/g,CAT活性增强476 U/g,非耐受Cr(Ⅵ)的真菌BCZO4细胞中抗氧化酶酶活性水平也有所增加,但总体活性低于BSLO1,两种真菌细胞中丙二醛含量都随着Cr(Ⅵ)浓度升高而增加。在一定Cr(Ⅵ)浓度范围内,Cr(Ⅵ)可以增强BSLO1细胞的抗氧化酶活性,去除ROS。非耐受Cr(Ⅵ)真菌BCZ04细胞中,抗氧化酶活性低于耐受Cr(Ⅵ)的BSLO1,因此我们推断,真菌BSLO1耐受Cr(Ⅵ)与细胞中抗氧化机制有关。BSLO1去除Cr(Ⅵ)的方式是将其还原为Cr(Ⅲ),收集BSLO1细胞内液提取物和胞外分泌液,发现两者均有Cr(Ⅵ)还原酶活性;通过浓缩BSLO1细胞分泌总蛋白,SDS-PAGE电泳图显示,在含有Cr(Ⅵ)培养条件下,分子量为30 kDa和35 kDa的蛋白质表达量显著增加,说明BSLO1还原Cr(Ⅵ)依赖于真菌细胞中还原酶。