【摘 要】
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吡虫啉（Imidacloprid）是第一代新烟碱类超高效杀虫剂,被广泛用于水稻中飞虱的防治,由于其良好的水溶性可能会对稻田系统中的非靶标生物带来危害。而黑斑蛙（Rana nigromaculata）作为我国分布最为广泛的稻蛙,主要生活在稻田中。因此本文以黑斑蛙蝌蚪为研究对象,开展吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的急性毒性、亚慢性毒性以及富集-消除。为吡虫啉在两栖动物的毒理学安全评价提供科学依据和理论依据。主要研
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吡虫啉（Imidacloprid）是第一代新烟碱类超高效杀虫剂,被广泛用于水稻中飞虱的防治,由于其良好的水溶性可能会对稻田系统中的非靶标生物带来危害。而黑斑蛙（Rana nigromaculata）作为我国分布最为广泛的稻蛙,主要生活在稻田中。因此本文以黑斑蛙蝌蚪为研究对象,开展吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的急性毒性、亚慢性毒性以及富集-消除。为吡虫啉在两栖动物的毒理学安全评价提供科学依据和理论依据。主要研究内容和结论如下:1、开展吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪中的急性毒性试验,结果得出吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪中的96 h-LC50值为173.6 mg/L,根据《化学农药环境安全评价实验准则第18部分-天敌两栖类急性毒性试验》毒性等级划分得到吡虫啉对Gosner 26期的黑斑蛙蝌蚪为低毒。急性毒性的试验结果也为后面的亚慢性毒性实验和暴露富集提供浓度依据。2、根据急性毒性的结果设定三个浓度即1.74、9.55、17.36 mg/L开展亚慢性毒性试验,研究吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的酶活性、生长以及甲状腺相关激素含量和甲状腺相关基因表达的影响。结果表明:吡虫啉一定程度地影响了抗氧化酶活性,通过谷胱甘肽S-转移酶（GST）酶活性水平的升高来解毒;吡虫啉诱导黑斑蛙蝌蚪产生了氧化应激,黑斑蛙蝌蚪体内的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）、胱甘肽还原酶（GR）和丙二醛（MDA）含量与对照组相比发生了显著变化。通过对黑斑蛙蝌蚪的体重、体长、尾长和鼻间距的测量来衡量吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的生长影响,结果表吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的体重、体长、尾长和鼻间距均显示出有抑制作用,并且浓度越大抑制越大。通过测定黑斑蛙蝌蚪甲状腺相关激素（T3、T4、TH和TSH）的含量以及甲状腺激素相关基因（dio2、dio3、trα和trβ）的表达量得到吡虫啉对黑斑蛙蝌蚪的内分泌有一定的干扰作用,从而抑制蝌蚪的生长。3、建立了吡虫啉在斑黑斑蛙蝌蚪和水中液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。结果表明,在0.002～2 mg/L范围内线性关系良好,吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪中的添加回收率在76.86～90.19%之间,相对标准偏差（RSD）在2.79～6.93%之间,检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别在0.0017～0.003 mg/kg之间和0.01～0.05 mg/kg之间。方法的灵敏度、准确度和精密度等均符合实验的要求。基于该检测方法开展富集-消除试验,研究吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪体内的富集及清除。富集阶段吡虫啉在蝌蚪体内的含量呈现先升高后降低最后趋于平衡,并且三个浓度吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪体内的生物富集系数（BCF）均小于10,说明吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪体内属于低富集性农药。在清除阶段,吡虫啉的降解半衰期为0.767～0.844 d,R~2为0.6858～0.7799,表明吡虫啉在黑斑蛙蝌蚪体内的清除过程较快,残留期较短,容易被清除。
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