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目的：
鼻内翻性乳头状瘤（nasal inverted papilloma，NIP）是鼻腔鼻窦常见的良性上皮性肿瘤，发生于Schneiderian膜（Schneiderian membrane）。好发于中老年男性，最常见的症状为鼻塞，大部分单侧发病，双侧病变的罕见。发病率约为0.4%-4.7%，且呈逐年上升趋势。NIP具有易复发和易恶变的特性，复发率约5%-47%，恶变率为5%-15%，最常见的恶变类型是鳞状细胞癌。鉴于NIP具有易复发、常破坏周围解剖学结构导致骨质重塑，以及具有恶变倾向等生物学行为特点，较多学者将其归为良性与恶性之间的交界性肿瘤或潜在恶性肿瘤。有关NIP的发病机制目前尚不清楚，可能的致病因素有吸烟、过敏或某些职业性接触等。NIP的分子改变包括关键基因的单核苷酸多态性、信号通路的改变以及免疫功能的改变等，但这些分子机制对NIP病理和转化作用仍不清楚。由于NIP具有易复发、易恶变的生物学行为特点，在病理形态方面尚无评估其生物行为的指标，因此，本研究的目的是采用目前公认的与细胞增殖及多种肿瘤发生、发展相关的生物标记物-P16、P53、Ki-67及HPV，检测它们在内翻性乳头状瘤中的表达水平，分析它们与内翻性乳头状瘤的临床病理特征的关系，为临床诊断及预后评估提供研究依据。
方法：
1、收集大连医科大学附属第二医院病理科2009年9月-2018年12月临床病理资料完整的存档蜡块共79例（79个蜡块）。其中内翻性乳头状瘤患者59例，包括复发组15例，初发组44例。对照组为20例鼻息肉样本，所有组织均为手术标本。
2、采用免疫组化方法检测各组中P16、P53、Ki-67的表达情况，分析上述标记物在内翻性乳头状瘤和息肉组织中表达的差异和各个指标之间的相关性，以及与临床病理参数的关系。
3、采用PCR-膜杂交的方法检测内翻性乳头状瘤组织中HPV DNA。
4、以SPSS22.0软件对比P16、P53、Ki-67在复发组、初发组及息肉组的表达差异，分析上述指标之间的相关性，以及与Krouse分期等临床参数的关系。以P＜0.05表示差异有统计学意义。
结果：
1、P16蛋白的表达
P16阳性表达于细胞核和（或）细胞质，在NIP组和鼻息肉（NP）组的阳性表达率分别为64.4%和10%；NIP组P16蛋白阳性表达率高于NP组，差异具有统计学意义（X2=17.668，P＜0.05）。比较复发组、初发组、息肉组之间P16蛋白表达强度的差异，可见三组之间中到强阳性（++—+++）的表达率呈递减趋势，分别为复发组66.67%、初发组34.09%、息肉组0%，三组之间差异具有统计学意义（X2=17.886，P＜0.05）；两两比较结果显示差异均有统计学意义。
2、P53蛋白的表达
P53在NIP组织中的免疫组化染色阳性信号定位于细胞核，呈黄色或棕黄色。P53在NP、NIP组的阳性表达率分别为0%和28.81%，NIP组阳性表达率高于NP组，差异具有统计学意义（X2=7.343，P＜0.05）。在复发组、初发组、息肉组中，P53中到强阳性表达率分别为6.67%、4.55%、0%，三组之间呈递减趋势，但差异无计学意义（X2=1.429，P＞0.05）。
3、Ki-67的表达
Ki-67免疫组化染色阳性信号定位于细胞核，呈棕黄色或深褐色，NIP组Ki-67高表达（≥10%）的比率高于NP组，分别为89.83%和25%，差异具有统计学意义（X2=32.168，P＜0.05）；复发组、初发组、息肉组三组之间两两比较结果显示，NIP复发组和初发组的Ki-67高表达比率均显著高于息肉组，分别为复发组86.67%、初发组90.90%、息肉组25%，差异具有统计学意义（X2=32.271，P＜0.05）；但NIP复发组和初发组比较，Ki-67高表达比率无统计学差异（X2=0.220，P＞0.05）。
4、比较复发组、初发组、息肉组三组之间的临床特征，可见NIP复发组中KrouseⅢ期的比例高于初发组（66.67%vs38.64%），差异具有统计学意义（P＜0.05）,其余临床特征各组之间无统计学差异。
5、P16、P53、Ki-67在NIP组织中表达的相关性，经Spearman相关性检验，P16、P53、Ki-67在NIP中表达无相关性。
6、P16、P53、Ki-67在NIP组织中的表达与临床参数的相关性，P16的表达与复发相关，即P16表达越强，复发率的可能性越大。其余指标与临床参数无相关性。
7、在Krouse分期中，晚期（Ⅲ期）NIP的Ki-67高表达（≥10%）率高于早期（Ⅰ期、Ⅱ期）NIP的Ki-67高表达率，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
8、对复发组P16呈中-强阳性（++—+++）表达的样本（共10例）进行HPV DNA检测，结果显示10例NIP组织中HPV均呈阴性。
结论：
1.P16蛋白在鼻内翻性乳头状瘤中的阳性表达率显著高于鼻息肉组，在内翻性乳头状瘤的复发组中的阳性表达率高于初发组；提示P16蛋白高表达可作为评估鼻内翻性乳头状瘤复发风险的参考指标。
2.P53蛋白在鼻内翻性乳头状瘤的复发组、初发组及鼻息肉组中阳性表达率呈递减趋势，提示P53蛋白表达增加对鼻内翻性乳头状瘤的复发风险具有一定的提示作用。
3.Ki-67的高表达（≥10%）率与鼻内翻性乳头状瘤的临床分期呈正相关，提示Ki-67高表达（≥10%）可以作为预测鼻内翻性乳头状瘤复发风险的潜在生物学指标。
4.本组P16蛋白高表达的鼻内翻性乳头状瘤组织中未检测HPV DNA，提示P16蛋白在内翻性乳头状瘤组织中高表达并非一定系HPV感染所致，可能与其他途径调控相关。
鼻内翻性乳头状瘤（nasal inverted papilloma，NIP）是鼻腔鼻窦常见的良性上皮性肿瘤，发生于Schneiderian膜（Schneiderian membrane）。好发于中老年男性，最常见的症状为鼻塞，大部分单侧发病，双侧病变的罕见。发病率约为0.4%-4.7%，且呈逐年上升趋势。NIP具有易复发和易恶变的特性，复发率约5%-47%，恶变率为5%-15%，最常见的恶变类型是鳞状细胞癌。鉴于NIP具有易复发、常破坏周围解剖学结构导致骨质重塑，以及具有恶变倾向等生物学行为特点，较多学者将其归为良性与恶性之间的交界性肿瘤或潜在恶性肿瘤。有关NIP的发病机制目前尚不清楚，可能的致病因素有吸烟、过敏或某些职业性接触等。NIP的分子改变包括关键基因的单核苷酸多态性、信号通路的改变以及免疫功能的改变等，但这些分子机制对NIP病理和转化作用仍不清楚。由于NIP具有易复发、易恶变的生物学行为特点，在病理形态方面尚无评估其生物行为的指标，因此，本研究的目的是采用目前公认的与细胞增殖及多种肿瘤发生、发展相关的生物标记物-P16、P53、Ki-67及HPV，检测它们在内翻性乳头状瘤中的表达水平，分析它们与内翻性乳头状瘤的临床病理特征的关系，为临床诊断及预后评估提供研究依据。
方法：
1、收集大连医科大学附属第二医院病理科2009年9月-2018年12月临床病理资料完整的存档蜡块共79例（79个蜡块）。其中内翻性乳头状瘤患者59例，包括复发组15例，初发组44例。对照组为20例鼻息肉样本，所有组织均为手术标本。
2、采用免疫组化方法检测各组中P16、P53、Ki-67的表达情况，分析上述标记物在内翻性乳头状瘤和息肉组织中表达的差异和各个指标之间的相关性，以及与临床病理参数的关系。
3、采用PCR-膜杂交的方法检测内翻性乳头状瘤组织中HPV DNA。
4、以SPSS22.0软件对比P16、P53、Ki-67在复发组、初发组及息肉组的表达差异，分析上述指标之间的相关性，以及与Krouse分期等临床参数的关系。以P＜0.05表示差异有统计学意义。
结果：
1、P16蛋白的表达
P16阳性表达于细胞核和（或）细胞质，在NIP组和鼻息肉（NP）组的阳性表达率分别为64.4%和10%；NIP组P16蛋白阳性表达率高于NP组，差异具有统计学意义（X2=17.668，P＜0.05）。比较复发组、初发组、息肉组之间P16蛋白表达强度的差异，可见三组之间中到强阳性（++—+++）的表达率呈递减趋势，分别为复发组66.67%、初发组34.09%、息肉组0%，三组之间差异具有统计学意义（X2=17.886，P＜0.05）；两两比较结果显示差异均有统计学意义。
2、P53蛋白的表达
P53在NIP组织中的免疫组化染色阳性信号定位于细胞核，呈黄色或棕黄色。P53在NP、NIP组的阳性表达率分别为0%和28.81%，NIP组阳性表达率高于NP组，差异具有统计学意义（X2=7.343，P＜0.05）。在复发组、初发组、息肉组中，P53中到强阳性表达率分别为6.67%、4.55%、0%，三组之间呈递减趋势，但差异无计学意义（X2=1.429，P＞0.05）。
3、Ki-67的表达
Ki-67免疫组化染色阳性信号定位于细胞核，呈棕黄色或深褐色，NIP组Ki-67高表达（≥10%）的比率高于NP组，分别为89.83%和25%，差异具有统计学意义（X2=32.168，P＜0.05）；复发组、初发组、息肉组三组之间两两比较结果显示，NIP复发组和初发组的Ki-67高表达比率均显著高于息肉组，分别为复发组86.67%、初发组90.90%、息肉组25%，差异具有统计学意义（X2=32.271，P＜0.05）；但NIP复发组和初发组比较，Ki-67高表达比率无统计学差异（X2=0.220，P＞0.05）。
4、比较复发组、初发组、息肉组三组之间的临床特征，可见NIP复发组中KrouseⅢ期的比例高于初发组（66.67%vs38.64%），差异具有统计学意义（P＜0.05）,其余临床特征各组之间无统计学差异。
5、P16、P53、Ki-67在NIP组织中表达的相关性，经Spearman相关性检验，P16、P53、Ki-67在NIP中表达无相关性。
6、P16、P53、Ki-67在NIP组织中的表达与临床参数的相关性，P16的表达与复发相关，即P16表达越强，复发率的可能性越大。其余指标与临床参数无相关性。
7、在Krouse分期中，晚期（Ⅲ期）NIP的Ki-67高表达（≥10%）率高于早期（Ⅰ期、Ⅱ期）NIP的Ki-67高表达率，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
8、对复发组P16呈中-强阳性（++—+++）表达的样本（共10例）进行HPV DNA检测，结果显示10例NIP组织中HPV均呈阴性。
结论：
1.P16蛋白在鼻内翻性乳头状瘤中的阳性表达率显著高于鼻息肉组，在内翻性乳头状瘤的复发组中的阳性表达率高于初发组；提示P16蛋白高表达可作为评估鼻内翻性乳头状瘤复发风险的参考指标。
2.P53蛋白在鼻内翻性乳头状瘤的复发组、初发组及鼻息肉组中阳性表达率呈递减趋势，提示P53蛋白表达增加对鼻内翻性乳头状瘤的复发风险具有一定的提示作用。
3.Ki-67的高表达（≥10%）率与鼻内翻性乳头状瘤的临床分期呈正相关，提示Ki-67高表达（≥10%）可以作为预测鼻内翻性乳头状瘤复发风险的潜在生物学指标。
4.本组P16蛋白高表达的鼻内翻性乳头状瘤组织中未检测HPV DNA，提示P16蛋白在内翻性乳头状瘤组织中高表达并非一定系HPV感染所致，可能与其他途径调控相关。