槲皮素作为饲料添加剂的安全性评价

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本研究采用急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30d喂养试验和蛋鸡56d喂养试验对槲皮素的安全性做出系统的、全面的评价,为槲皮素成为绿色的、天然的功能性饲料添加剂及其在畜牧生产中应用提供理论基础。本研究包括以下三部分内容:1.急性毒性:本试验取20只昆明种小鼠(体重18~22g,雌雄各半)间隔4h灌胃,使槲皮素剂量达到10g·(kg·bw)-1,并观察14d有无毒性反应。结果显示,小鼠无任何异常表现,无一死亡,表明槲皮素半数致死量大于10g·(kg·bw)-1,属于实际无毒类物质。2.致突变性:①Ames试验:本试验采用鼠伤寒沙门氏菌突变菌株TA97、TA98、 TA100和TA102,槲皮素剂量分别为8、40、200、1000和5000μg/皿,并设阳性对照组(分别采用叠氮钠1.5μg/皿、敌克松50μg/皿、2-乙酰氨基芴10μg/皿、1,8-二羟蒽醌50μg/皿)和溶剂对照组(蒸馏水0.1mL/皿),每组3个重复,在加与不加S-9情况下重复两次试验,阳性对照组的回复突变菌落数极显著高于溶剂对照组(P<0.01),槲皮素各剂量组回复突变菌落数与阴性对照组差异不显著(P>0.05),且无剂量反应关系,表明此剂量下槲皮素对鼠伤寒沙门氏菌回复突变率无显著影响;②小鼠骨髓细胞微核试验:50只昆明种小鼠(体重25~35g,雌雄各半)随机分5组,每组10只。采用30h试验法,槲皮素剂量分别为0.5、5、10g·(kg·bw)-1,阴性对照组采用0.5%羧甲基纤维素,各试验组与阴性组采用灌胃方法,阳性对照组采用0.04g·(kg·bw)-1环磷酰胺腹腔注射。阳性对照组微核率极显著高于阴性对照组(P<0.01),槲皮素各剂量组微核率和PCE/RBC值与阴性对照组差异不显著(P>0.05),且无剂量反应关系,表明此剂量下槲皮素对小鼠骨髓细胞微核率无影响,且无细胞毒性作用;③小鼠精子畸形试验:50只昆明种雄性小鼠(体重25~35g)随机分5组,每组10只。槲皮素剂量分别为0.5、5、10g·(kg·bw)-1,阴性对照组采用0.5%羧甲基纤维素,各试验组与阴性组采用灌胃方法,阳性对照组采用0.04g·(kg·bw)-1环磷酰胺腹腔注射,连续给药5d,阳性对照组精子畸形率极显著高于阴性对照组(P<0.01),槲皮素各剂量组精子畸形率与阴性组无显著差异(P>0.05),且无剂量反应关系,表明此剂量下槲皮素对小鼠精子畸形率无影响。3.慢性或亚慢性毒性:①大鼠30d喂养试验:80只Wistar大鼠(体重150~180g,雌雄各半)随机分4组,每组20只。分别连续饲喂含槲皮素0.0%、0.4%、2%、10%的饲料30d,槲皮素各组雌、雄大鼠的体重增重、采食量、饲料转化率与对照组相比均无显著差异(P>0.05),也无任何临床毒性症状;②蛋鸡56d喂养试验:240只海赛蛋鸡(29周龄)随机分4组,每组6个重复,每个重复10只。每组分别连续饲喂含槲皮素0.0%、0.02%、0.04%、0.06%饲料8周,槲皮素各组蛋鸡每日采食量、平均蛋重与对照组均无显著差异(P>0.05);槲皮素各组蛋鸡的体重增重、采食量、饲料转化率与对照组相比均无显著差异(P>0.05),也无任何临床毒性症状。表明此剂量槲皮素长期饲喂蛋鸡和Wistar大鼠,不会产生慢性或亚慢性中毒。综上所述,本试验条件下,槲皮素既无急性毒性、慢性或亚慢性毒性,也无致突变性。本研究结果提示槲皮素在体内、体外均无急性毒性、致突变性和慢性或亚慢性毒性,槲皮素可以作为一种安全的饲料添加剂应用于畜牧生产中。
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