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目的: 本课题以去势大鼠为研究对象,运用骨组织形态计量学方法,观察针灸及山茱萸总甙对骨代谢指标的影口内,并在不同组间进行了对照研究,初步探索针灸防治骨质疏松症(Osteoporosis, OP)的机理,为临床推广应用针刺和艾灸方法防治骨质疏松症提供实验依据,以求找到一条防治骨质疏松症的有效途径。 方法: 1.实验动物与分组:选取6月龄Wistar健康雌性大鼠共70只,随机分为七组:假手术组、模型组、针刺组、艾灸组、山茱萸高剂量组、山茱萸中剂量组、山茱萸低剂量组。每组10只。 2.OP动物模型复制:除假手术组外,各组大鼠均摘除双侧卵巢。术后所有动物在同一条件(室温19-24℃,相对湿度40%左右)用普通饲料饲养,自由饮水。 3.针灸及给药方法:术后第四日开始,针刺组每日针刺双侧“肾俞”穴和“三阴交”穴,每次捻转补法1分钟,艾灸组每日艾灸双侧“肾俞”和“三阴交”穴,每次5分钟,每周六次,连续三个月。 山茱萸总甙组灌胃的剂量按人与大鼠体表面积比折算成大鼠等效剂量。其浓度分别为3.56g·kg-1,(1.5倍等效剂量),2.16g·kg-1,(1倍等效剂量),1.08g·kg-1(0.5倍等效剂量)。每日一次,每次8ml每周6次,连续灌胃三个月。 4.骨四环素活体标记:各组大鼠在取材前10天和前1天分别按30mg/kg给予两次腹腔注射盐酸四环素(Tetracyclin),进行活体四环素标记,处死后立即截取右侧股骨,剔除皮肤和肌肉,以体积分数为70%的酒精固定,以备制作骨切片。 5.观察方法:对股骨内髁不脱钙骨切片标本选择骺板下小梁骨,分内、中、外三点选取图像录入微机。每个标本采用三种观察方法,每种三个图像,(组织学观察用Gemisa染色、普通光源;类骨质观察用von kossa染色;四环素标记观察用荧光显微镜)采用美国Pixera6000CL图象分析系统,利用Image-Pro plus软件进行骨组织形态计量学测定,数据再使用SPSS11.5统计软件包进行统计学处理。