大豆疫霉PsHSFsL基因的功能研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:chenlijuan1986
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大豆疫霉(Phytophthora sojae)是一种破坏性极强的植物病原卵菌,其引致的大豆疫病是大豆生产上的毁灭性土传病害。为了探讨大豆疫霉的分子致病机制,本研究在课题组前期转录组测序结果的基础上,选取了一个可能参与调控大豆疫霉休止孢萌发的基因Ps HSFs L,并构建了其沉默和过表达2种质粒载体,再使用PEG介导的原生质体转化方案,将2种质粒分别转入大豆疫霉;通过含有G418抗性的培养基来筛选出备选转化子,再利用定量验证,挑选出效率较好的沉默与过表达转化子各2株。通过对这4株转化子进行生长表型测定、微观形态的观察和致病力强弱的研究,明确该基因在大豆疫霉中的功能,并得出以下结论:1、基因Ps HSFs L的沉默与过表达,对大豆疫霉孢子囊的形态大小没有显著影响,而该基因的沉默,会导致大豆疫霉休止孢出芽的形态出现分叉、畸形。2、基因Ps HSFs L的沉默,会显著降低大豆疫霉胞外蛋白漆酶的活性,而基因Ps HSFs L的过表达,会显著提高大豆疫霉分泌的总蛋白和漆酶的含量。3、胁迫条件对转化子生长速率的影响结果显示,基因Ps HSFs L的沉默与过表达转化子,仅对活性氧的胁迫表现出显著敏感。4、通过测定比较野生型与这4株转化子对大豆植株、大豆叶片、黄豆芽的致病力,结果表明,基因Ps HSFs L的沉默,会显著降低大豆疫霉的致病力。综上所述,我们证实了该基因与大豆疫霉休止孢出芽的正确形成有关,并参与调控大豆疫霉对大豆的致病性,这证实了大豆疫霉的细胞壁蛋白在致病性中的重要性。本研究结果为研究该类蛋白质在大豆疫霉侵染大豆期间的作用机制提供了理论依据,也为研究大豆疫霉的致病机理提供了新的研究思路和方法。
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