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研究目的：子宫内膜异位症(Endometriosis，EM)是子宫内膜组织(腺体和基质)种植于子宫以外的雌激素依赖性疾病，在育龄期妇女中的发病率约为10-20％，目前尚无理想的治疗方法。临床和实验显示，葛根素(Puerarin)是一种具有弱雌激素效应的植物雌激素，它可以通过与雌激素竞争性结合雌激素受体(estrogenreceptor，ER)，表现出抗雌激素效应。本课题主要测定葛根素与雌激素竞争结合ER的能力，从非基因组途径探索葛根素拮抗雌激素的效应从而达到治疗EM目的的分子机制。 研究方法：分离并体外培养子宫内膜异位基质细胞(EndometrioticStromalCells，ESCs)，应用同位素标记竞争结合实验测定葛根素与雌二醇(17β-estrodial，E2)竞争性结合ER的能力；用CCK-8法检测葛根素和雌二醇-牛血清白蛋白(17β-Estrodial-BovineSerumAlbumin，E2-BSA)对细胞增殖能力的影响；选用人蛋白激酶磷酸化芯片，筛选雌激素非基因组途径相关信号通路，用WesternBlotting检测葛根素对E2-BSA非基因组途径相关通路的影响；用Realtime-PCR检测葛根素对与EM密切相关的基因cyclinD1、cox-2、cyp19表达的影响；使用ER拮抗剂ICI182，780以及细胞外信号调节激酶1/2(ExtracellularSignal-RegulatedKinases，ERK1/2)上游激酶MEK1/2的抑制剂U0126进一步研究葛根素发挥作用的分子机制。 研究结果：成功分离培养ESCs，葛根素能和E2竞争性结合ER，其IC50为0.869μmol/L，而E2的IC50为0.282μmol/L，故葛根素的相对结合亲和力(RelativeBindingAffinity，RBA)为32.2％；10-4mol/LE2-BSA可以短暂而快速地激活膜受体介导的ERK1/2信号通路磷酸化(P<0.05)，显著诱导ESCs相关基因cyclinD1、cox-2和cyp19的表达(P<0.05)，显著促进ESCs的增殖(P<0.05)。葛根素能显著抑NE2-BSA对ERK1/2磷酸化的激活作用及对cyclinD1、cox-2和cyp19表达的促进作用，逆转E2-BSA对ESCs促增殖的作用(P<0.05)。ICI182，780和U0126能显著阻断葛根素抑制E2-BSA促细胞增殖以及相关基因表达的作用。 研究结论：葛根素能和E2竞争性结合ER，且其竞争能力约是E2的1/3。葛根素能抑制雌激素通过非经典的雌激素膜受体(membraneEstrogenReceptor，mER)途径对ERK1/2信号通路的激活及对cyclinD1、cox-2、cyp19基因表达的诱导作用，从而显著降低ESCs的增殖能力，抑制异位内膜的生长，并降低PGE2水平，抑制EM的炎症过程，阻断局部E2的自分泌及其正反馈机制，达到改善盆腔内环境、治疗EM的作用。