血管生成是原发性肿瘤生长、转移及浸润到邻近正常组织的重要环节。实验研究及临床资料表明，肿瘤的生长和转移都依赖于血管生成。与正常血管相比，肿瘤新生血管结构迂曲，血流不规则，通透性增加。免疫组织化学法可检测肿瘤内微血管密度(microvessel density，MVD)，其程度可反映肿瘤细胞及其支持基质的血管生成活性。大量研究表明，血管生成活性增强与多种恶性肿瘤的不良预后有关，包括胃癌。血管生成是一复杂的过程，是促血管生成因子和血管稳定因子共同作用的结果，涉及多种途径，最终导致内皮细胞增殖、分化，组成一有功能的血管网。而抑制血管生成过程、从而阻止肿瘤生长已成为实体瘤治疗学研究的新热点。 环氧合酶(cyclooxyengase，COX)是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，有二种同功酶，即环氧合酶1(COX-1)和环氧合酶2(COX-2)。COX-1为一固有酶，调节控制生理功能的多种前列腺素产生，如保护胃粘膜、调节肾血流、维持血小板的聚集功能等。COX-2为一诱导酶，炎症、丝裂原刺激、生长因子和细胞因子等信号可诱导其产生，从而使前列腺素在炎症及肿瘤部位的合成增加。大量研究表明，COX-2蛋白在结肠癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌及前列腺癌中可过度表达。同时，有少量报道表明，在人类结直肠癌和子宫内膜癌COX-2可通过上调血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)而促进肿瘤血管生成，表明COX-2可能对肿瘤的进展起一定作用。 很多证据显示，非甾体类抗炎药(nonsteroidal antiinflammatory drugs，NSAIDs)特别是阿司匹林可减少结直肠癌和腺瘤的风险。流行病学研究和动物实验已经证明其 阿司匹林和NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究抗肿瘤作用，随机试验表明舒林酸和塞莱昔布可使家族性腺瘤性息肉病患者的腺瘤消退。人群研究及病例对照调查研究也表明，口服阿司匹林和其它NSAIDs可降低胃癌的发生率。NSAIDs降低胃癌风险的机制尚不清楚，抗血管形成作用可能在其中起一定作用。 胃癌是中国最常见的恶性肿瘤之一。胃切除手术联合化疗和/或放疗是治疗胃癌的常规手段。迄今为止，阿司匹林对胃癌增殖及血管形成影响的研究尚未见文献报道。仅有少数有关选择性COX一2抑制剂对胃癌细胞凋亡、血管生成和增殖的研究。本研究拟探讨阿司匹林和选择性COX一2抑制剂NS一398对胃癌SGC7901细胞体外增殖的影响，同时观察对COX一2和VEGF的抑制作用。用免疫组织化学方法观察胃癌裸鼠移植瘤的微血管密度，以探讨阿司匹林和NS一398对胃癌血管生成的影响。本研究分为以下三部分:第1部分阿司匹林及NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖及细胞周期的影响 方法: 1.采用噬哩蓝(MTT)法观察阿司匹林和NS一398对体外培养胃癌SGC7901细胞 增殖的影响。 2.流式细胞仪(F CM)检测阿司匹林和NS一398对SGC7901细胞周期的作用。 3.统计学处理:应用SPSS 10.0统计软件包，不同药物浓度、不同时间对变量 影响采用双因素方差分析，均数间两两比较采用LSD法或DuImett’s法。以 。二0.05作为检验水准。 结果 1.MTT检测表明，阿司匹林呈时间和浓度依赖性对SGC7901细胞活性产生抑 制，吸光度值明显下降(F时间=109.81，p<0.0001。F药物雄=30.25，p<0.0001)。 阿司匹林浓度为o.lmol几时，24，48和72h抑制率分别为7.1%，10.4%和 24.5%;浓度为1 .ommol/L时抑制率分别为7，9%，15.5%和50.5%;浓度为 8.ommol几时抑制率分别为10.2%，23.6%和81.3%。 2.MTT检测表明，NS一398呈时间和浓度依赖性对SGC7901细胞活性产生抑制， 吸光度值明显下降(F时间=131.01，P<0.0001OF药物雄=55.50，P<0.0001)。NS一398 浓度为10协mol几时，NS一398作用24，48和72h，SGC7901细胞的抑制率分 别为3.8%，12.0%和19.8%;浓度为50林mol几时抑制率分别为5.1%，17.4% 阿司匹林和NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究 和35.8%;浓度为100“mol几时抑制率分别为12.4%，28.1%和51.1%。 3.流式细胞仪检测表明，经终浓度为0.lmmol/L，1.ommol/L，8.Ommol/L阿司匹 林处理24小时后，GO/Gl期细胞比例各为62.5士1.7，64.7士1.9，67.6士1.8， 显著高于对照组护<0.0001)。经终浓度为10林 mol/L，50砰mol/L，100林mol/L NS一398处理24小时后，GO/G1期细胞比例各为59.8士1.9，69.3士1.1，72.1 士2.2，显著高于对照组(P<0.0001)。第2部分阿司匹林和Ns一395对人胃癌SGC7901细胞体外pGEZ、CoX一2、VEGF的作用 方法 1.采用ELISA法测定药物作用前后培养液中PGE:水平的变化。 2.采用RT一PCR技术测定药物作用前后细胞中COX一2 mRNA的表达。 3.采用免疫印迹(Western blot)法测定细胞内COX一2和VEGF的蛋白表达变化。 4.统计学处理:应用SPSS 10.0统计软件包，采用t检验对计量资料进行统计 学分析。COX一2和PGEZ、COX一2和VEGF进行相关分析。以a