急性移植物抗宿主病患者血浆miR-155的表达及其临床意义

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背景急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后最常见的并发症,约40-60%,大多需要全身治疗,在炎症的效应阶段表现为“细胞因子风暴”,且Ⅱ-Ⅳ度aGVHD中约30%-60%的患者会进展为激素耐药的aGVHD(steroid resistant aGVHD,SR-aGVHD)。microRNA具有调节免疫细胞的增殖分化等功能,维持免疫系统的稳态。miR-155是其重要的一员,并且多篇研究显示mi R-155不仅存在于人体的细胞中,还存在于细胞外液中。循环中miRNA较稳定,在高温、强酸、强碱环境不变性降解,且血浆中的不易被RNase酶分解,只有在机体病理状态下其表达水平发生改变。目的1、探讨血浆miR-155表达在aGVHD患者移植前后不同时间段的水平变化。2、结合患者的临床症状、体征和实验室检查,揭示血浆miR-155在aGVHD的临床意义。材料与方法收集我院2016年5月1日至2016年10月31日6例移植后发生aGVHD患者的外周血样本30份进行分析。(1)d0、移植后d7、d14、d21、d28取外周血10ml,经1000rpm离心10min,取上清液即血浆。(2)取血浆采用miRNeasy Serum/Plasma kit试剂盒提取microRNA,逆转录为cDNA,再PCR扩增检测miRNA-155的表达水平,采用2-△△Ct法计算miR-155相对表达量。(3)取血浆通过ELISA检测方法,检测TNF-α、IL-4、IL-7、IL-10的表达水平。(4)收集6名患者的病例资料、实验室检查结果。(5)采用SPSS21.0统计软件对临床和实验数据进行分析及处理,p<0.05为差异具有统计学意义。结果1、qRT-PCR结果提示miR-155的相对表达量在移植后逐渐升高,d21、d28的miR-155相对表达量与d0、d7、d14相比,差异具有统计学意义(p<0.05)。同一患者,血浆miR-155的表达水平与aGVHD的临床分级呈正相关。2、ELISA结果提示移植后患者血浆TNF-α、IL-7水平逐渐升高,IL-4、IL-10水平逐渐降低,但不同时间点各种细胞因子的表达水平变化比较,差异不具有统计学意义(p>0.05)。结论allo-HSCT后mi R-155表达的水平变化较临床症状出现早且明显,与aGVHD的临床分级呈正相关,因此,血浆miR-155可能有早期预测aGVHD的临床意义。
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