目的缺血性中风会引发氧化应激进而产生大量的活性氧（ROS）。ROS通过氧化和破坏脑微血管内皮细胞膜以及神经元进而导致脑内皮细胞和神经元死亡,从而加剧脑损伤和脑梗塞。依达拉奉（Edaravone,Edv）作为强自由基清除剂通过消除氧自由基,抑制脑细胞过氧化,并减少组织损害,从而在临床上被用于缺血性脑卒中病人的治疗。然而,Edv的半衰期短且生物利用度低,因此必须注射较高剂量的Edv（30 mg,2次/天）,这会导致诸如肾功能障碍的并发症。另外,由于Edv的稳定性较差,需要临时准备并在半小时内完全静脉注射。这些问题影响了Edv在缺血性中风在临床治疗中的有效使用。因此,寻找新的策略来提高Edv的安全性和可利用率以便更好地治疗缺血性中风至关重要。血浆外泌体（Blood Exosome,Exo）是一种天然的药物载体,具有天然的脑靶向性,并且具有较好的生物相容性,能高效地透过血脑屏障（BBB）。因此本研究选择具有天然脑靶向性的血浆外泌体作为一种药物载体,通过孵育载药的方式装载Edv来提高Edv的稳定性和脑靶向性。利用了体内及体外摄取实验探究载依达拉奉的血浆外泌体（Exo-Edv）的脑靶向性;通过H&E染色实验和溶血实验来检测Exo-Edv的体内安全性;通过神经学评分、TTC染色、尼氏染色等实验来探讨Exo-Edv对缺血性卒中大鼠的神经保护作用。方法本研究建立了Exo含量的BCA蛋白定量法,并对Exo的标志性蛋白、粒径和形态进行考察;通过紫外-可见分光光度计（UV）法来检测Edv的药物浓度,考察了其线性、精密度、重复性、回收率等方法学;通过正交实验筛选制备Exo-Edv的最优方法;通过4℃孵育法制备Exo-Edv,并对Exo-Edv的形态、粒径、标志性蛋白、稳定性、包封率等参数进行考察;通过溶血实验、H&E染色实验考察了Exo-Edv的体内安全性;建立了HPLC法对Exo+DEV的体内药代动力学进行考察,并对药物的组织分布进行考察;利用体内体外摄取实验,评估了Exo-Edv的脑靶向性;通过TTC染色、神经功能评分、尼氏染色实验,研究了Exo-Edv对永久性缺血脑卒中大鼠的神经保护作用。结果本研究建立的Exo含量的BCA定量法,测定的Exo浓度为52.8 mg/m L,粒径为150 nm左右,形态呈均匀的小球状,且高度表达外泌体的标志性蛋白,表明超速离心提取得到的是纯度较高的血浆外泌体;在建立的Edv的UV定量分析方法下检测的线性、精密度、重复性以及回收率等方法学均符合要求。通过正交实验筛选出制备Exo-Edv的最优制备方法:血浆外泌体与Edv置于4℃孵育24h,Edv孵育的浓度为1 mg/m L,血浆外泌体的浓度为1 mg/m L。制备的Exo-Edv结构完整,呈形态规则的小球状,粒径均一,稳定性良好,体内体外摄取实验结果表明,Exo-Edv能靶向到缺血半影区的脑微血管内皮细胞,并且与半影区的神经元细胞很好地共定位。药代动力学研究的结果表明,Exo-Edv能够延长DEV的半衰期,降低Edv的清除率,提Edv的体内稳定性,TTC染色和神经功能评分结果显示,Exo-Edv能够减少PMCAO大鼠的脑梗死体积,并改善其神经功能学评分,说明Exo-Edv对缺血性脑卒中大鼠的脑损伤具有很好的保护作用。尼氏染色的结果显示,Exo-Edv能够抑制脑缺血对尼氏小体的损伤,减轻尼氏小体因缺血而造成的膨大,增加尼氏小体数量,提高神经元的活力,进一步说明Exo-Edv对缺血性脑卒中大鼠脑损伤的神经保护作用。溶血性实验结果和H&E染色实验结果表明,Exo-Edv不会产生溶血现象,也不会使各器官发生病理学改变,证明了Exo-Edv具有良好的生物安全性。结论本研究制备的载依达拉奉的血浆外泌体具有脑靶向性,能够通过转铁蛋白与转铁蛋白受体相结合的原理靶向到大脑缺血侧的梗死区域,并且能降低脑梗死体积,提高神经功能学评分,增加尼氏小体数量,增加阳性神经元数量,最终达到神经保护的作用。这些研究结果为Exo-Edv恢复缺血性脑卒中损伤的潜在临床治疗提供了一定的的实验依据。