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9-硝基喜树碱(9-Nitro-camptothecin,9-NC)是喜树碱衍生物,为广谱抗肿瘤药。它与常用抗肿瘤药物均无交叉耐药性,对多种肿瘤细胞具有较强的抗肿瘤活性,其中,对胰腺癌的显著疗效在已得到FDA的承认。但是,9-硝基喜树碱在水中溶解度极小,药物化学稳定性差,见光易降解,遇碱、水,内酯环易发生开环而失去活性,胃肠道刺激性大,且口服绝对生物利用度低。静脉注射消除快,血药浓度维持时间短,疗效差。因此,目前国内外尚无可供临床应用的注射剂问世。羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)是FDA和SPDA批准的第一个可供静脉注射的环糊精衍生物,并有用其增溶的伊曲康唑注射液上市。本文针对9-NC的缺陷,设计和发展了一种可在临床应用时完全溶解、稳定性好的9-NC注射用冻干粉针剂及其制备方法,并对其体内外性质进行了评价。通过相溶解度法进行处方前研究,结果表明,在常用的几种环糊精和环糊精衍生物中,HP-β-CD表现出较好的增溶作用,包合常数Kc为184.8M-1,包合过程为AL型,即1:1包合。通过热力学参数的测定可知,包合过程为吸热反应,升高温度有利于反应的进行。pH对包合物的形成也有影响,pH升高9-NC易水解,包合物稳定性下降,在工艺考察时需要注意。通过单因素考察,确定了以混悬冻干法制备9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉的处方工艺,9-NC溶解度可达到0.52mg/mL,比9-NC原料药在水中的溶解度提高了140倍。所得包合物冻干粉体外溶出行为良好,5min内,包合物完全溶出。通过对9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉水解动力学的研究,HP-β-CD包合能够抑制9-NC的水解,提高水解平衡状态时内酯型的比例。9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉用生理盐水稀释50倍和100倍后,4h内的药物含量保持稳定,无明显析出。比较了9-NC混合溶剂溶液和9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉对三种贴壁细胞(Skov-3, MCF-7和Hela),以及悬浮细胞S-180的细胞毒性。结果表明,包合物的IC50显著性降低,说明包合物具有更强的细胞毒性。稳定性试验结果表明,9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉需在避光干燥条件下保存,加速试验条件为40℃,RH75%,6个月内包合物冻干粉药物含量保持稳定。室温下,12个月的长期试验结果也显示包合物冻干粉药物含量保持稳定。比较了静脉注射和肌肉注射后,9-NC/HPβ-CD包合物冻干粉和9-NC混合溶剂溶液的大鼠体内药动学。结果表明,包合物能提高药物的血药浓度和内酯型药物的比例。建立S180荷瘤小鼠模型,对9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉的体内药效学进行了评价,用HP-β-CD包合,能够提高药物的抗肿瘤活性。高剂量组(3mg/kg)和低剂量组(1 mg/kg)的抑瘤率均>70%。通过溶血试验,肌肉刺激性试验和血管刺激性试验考察了注射用9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉针剂的生物适应性,结果提示,9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉并不适宜作为注射剂直接静脉注射,肌肉注射或者用生理盐水稀释后静脉滴注比较安全。通过组织切片,血液学,血清生化指标比较了9-NC混合溶剂溶液和注射用9-NC/HP-β-CD包合物冻干粉针剂的安全性,结果发现,通过HP-β-CD包合来取代有机溶剂,能够降低药物对免疫系统,肝肾器官的毒性,提高9-NC注射剂的安全性。