Lactobacillus plantarum 12对DSS诱导小鼠形成结肠炎的影响

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溃疡性结肠炎(UC)是常见的炎症性肠病,可造成宿主的体重减轻、腹泻和发烧等症状,长时间的结肠炎症可能发展为结肠癌。某些乳杆菌属细菌因其良好的益生性被人们广泛研究,且有大量相关报道乳杆菌对结肠炎症有良好的治疗效果。本论文以大连市益生菌功能特性研究重点实验室保藏的4株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum 4、L.plantarum 12、L.plantarum 14、L.plantarum 37)为研究对象,通过研究菌株胃肠液耐受力、安全性评价及其对DSS诱导结肠炎小鼠的影响,旨在获得一株能够缓解结肠炎症的乳杆菌。本文首先测定了4株植物乳杆菌(L.plantarum 4、L.plantarum 12、L.plantarum 14、L.plantarum 37)在模拟胃肠道条件下的耐受性及安全性。其中L.plantarum 4、L.plantarum 12在人工模拟胃液(pH=2.5)环境中处理3 h的存活率分别为98.97%、95.50%,随后在人工模拟肠液环境中处理8 h的存活率分别为79.18%、84.14%;乳杆菌粘附HT-29细胞实验发现,L.plantarum 12粘附指数为18.02±5.2 CFU/cell,显著高于L.plantarum 4粘附指数(p<0.05),胆盐水解酶测定结果显示,L.plantarum 12为胆盐水解酶阳性菌株,因而具有一定的耐胆盐能力;L.plantarum 12不产对人体有害的生物胺类物质,且具有γ溶血性。因此L.plantarum 12是一株具有良好胃肠道耐受性和安全性菌株。其次研究了L.plantarum 12对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导BALB/c小鼠结肠炎的影响。结果显示,灌胃L.plantarum 12的结肠炎小鼠,可减缓结肠炎小鼠体重下降、结肠缩短等症状;观察结肠炎小鼠结肠组织切片,发现灌胃L.plantarum 12可以减轻结肠炎小鼠结肠细胞隐窝及杯状细胞的消失;与模型组相比,灌胃L.plantarum 12可显著降低(p<0.05)结肠炎小鼠血清中促炎因子白细胞介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达量,提升抗炎因子白细胞介素10(IL-10)的表达量,说明L.plantarum 12在一定程度上可缓解结肠炎小鼠的炎症反应。利用16S rDNA基因测序和蛋白组学技术研究DSS诱导结肠炎小鼠肠道菌群及肠道蛋白质表达变化。L.plantarum 12可以提高结肠炎小鼠肠道菌群多样性,促进有益菌群的生长,有效抑制肠道内致病菌生长,缓解结肠炎小鼠肠道的菌群失调,促进肠道菌群的恢复;灌胃L.plantarum 12可以抑制结肠炎小鼠结肠内Tnfaip8、Bax等促炎蛋白的产生,刺激MUC2等肠粘膜蛋白及HSP70等应激蛋白的产生,从而缓解结肠炎小鼠的炎症反应。综上所述,L.plantarum 12可以缓解DSS诱导的BALB/c小鼠结肠炎症状,因此L.plantarum 12具有缓解结肠炎症性疾病的益生功能。
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