猪繁殖与呼吸综合征病毒对两种猪致病性及其新型受体阳性细胞定位研究

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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)于1987年首次在美国发现并报道,随后迅速在全球范围内传播,并在猪群中造成严重的经济损失。PRRSV是由病毒引起的高度接触性传染性疾病,可导致母猪晚期流产、早产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率。目前世界范围内普遍存在PRRS,加上PRRSV的高度变异性,常规的疫苗效果不理想,PRRS已成为当前危害养猪业最严重的传染病之一。但到目前为止,对于PRRSV与受体之间相互作用的分子机制了解的很少,PRRSV侵入的各个具体的环节是怎样的?除了已公认的四个受体外,其他介导PRRSV进入细胞的蛋白有哪些?这些蛋白在组织中的分布是否存在差异?PRRSV对不同品系猪种的致病性是否相同?对这一系列问题的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、致病性及致病机理的揭示。本研究使用PRRSV分离株分别感染商品长白猪和莱芜黑猪,对感染PRRSV前后的主要组织进行病理组织学观察,并对两种猪感染PRRSV前后的主要组织中的新型受体分布进行免疫组织化学定位。同时,对莱芜黑猪感染PRRSV后的血常规指标进行监测,并使用荧光定量PCR方法检测感染一段时间内莱芜黑猪脾脏和肺脏中病毒负载量的变化趋势。结果表明,商品长白猪对感染的PRRSV分离株较敏感,组织病变明显,主要表现在肺脏出现明显的间质性肺炎,主要组织器官中均出现不等量的淋巴细胞浸润以及不同程度的损伤,对试验猪造成较明显的免疫抑制,新型受体阳性细胞定位表明受体分布的位置和病毒在组织中的分布基本一致,但攻毒前后在组织中没有变化;莱芜黑猪的组织病变较轻微,主要表现肺脏出现轻微的间质性肺炎,部分淋巴结出现坏死性炎症,新型受体分布与商品猪的大致相同,但攻毒前后在肺脏、脾脏、淋巴结和扁桃体等组织器官中有较明显的变化,血常规检测可见莱芜黑猪感染PRRSV后第10天白细胞总数和淋巴细胞达到最高,之后急剧下降并在第14天时血常规指标再次趋于稳定,整个试验过程中脾脏和肺脏均可以检测到病毒存在,但在感染7天后含量逐渐降低,其与白细胞的动态变化基本一致,说明机体对PRRSV产生了明显的抗性。本研究通过体内试验结果表明新型受体分布和病毒分布基本一致,PRRSV造成组织病变较严重的肺脏和淋巴结在感染后新型受体逐渐增加,进而证明新型受体与PRRSV感染细胞密切相关;莱芜黑猪通过免疫状态的改变和新型受体量的变化,对PRRSV产生了明显的抗性。本研究结果为寻找中国地方猪种对PRRSV的遗传抗性或易感性的基因差异奠定了基础。
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