兰科石斛属根部内生真菌及其对种子萌发和苗木生长的效应

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石斛属(Dendrobium)植物是兰科植物中仅次于兰属的第二大属。石斛是我国常用中药之一,由于它的市场需求量不断增加,巨额的利润诱惑致使其野生数量锐减。在自然条件下,兰花种子的萌发和植株的生长都离不开兰科菌根真菌的参与。本研究选取了在湖南、广西、安徽、贵州四种不同生境中生长的8种石斛作为研究对象,包括铁皮石斛(D.officinale)、罗河石斛(D.lohohense)、重唇石斛(D. hercoglossum)、霍山石斛(D.huoshanense)、细茎石斛(D.moniliforme)、细叶石斛(D.hancockil)、美花石斛(D.loddigesii)和束花石斛(D.chrysanthum)。于2009年和2010年石斛的生长期采集营养根,进行内生真菌的分离鉴定,然后对所分离的真菌进行多样性分析,并对霍山石斛种子进行室内种子共生萌发试验,对细茎石斛原球茎及组培苗进行了真菌回接实验,讨论菌根真菌与兰科石斛属植物的共生效应。主要结果如下:1、通过根段切片分离法,共获得内生真菌菌株87个。利用形态观察和分子生物学相结合的方法鉴定的结果显示,以肉座菌目(Hypocreales)和炭角菌目(Xylariales)的种类为主的子囊菌为优势种类,占所分离到的真菌的大多数;担子菌则以胶膜菌科(Tulasnellaceae)为主。物种丰富度分析表明,同种石斛在不同生境下和不同石斛在相同生境下内生真菌的多样性都很丰富,并表现出一定的差异性。2、用来在室内做霍山石斛种子共生萌发试验的20个供试菌株为之前所分离的真菌菌株。经过12周之后,种子活力为37%的霍山石斛种子与这些供试菌株共生萌发效果来看:能使霍山石斛种子萌发的菌株有6个。研究结果表明霍山石斛的萌发率不受种子活力的影响。3、本研究对细茎石斛原球茎和组培苗进行了回接试验的目的有两点,一是从三种不同的共生培养基中选出最佳回接培养基,二是进一步探究兰科石斛属植物菌根真菌与兰科植物的共生效应。研究结果表明:原球茎和组培苗对于真菌菌株回接的最佳培养基是燕麦培养基;能够促使原球茎较好地分化发育的菌根真菌有2株,对细茎石斛组培苗有明显促生作用的真菌有9株。通过对回接菌根真菌的组培苗的菌根进行染色,可以观察到菌丝团的存在,这表明菌根共生体系已经成功建立。
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