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本试验深入研究了咸鸭蛋蛋清的碱水解、酸水解、单酶水解、双酶水 解和发酵水解的规律及其相应水解产物的理化特性,从而为利用咸鸭蛋蛋 清生产生物活性多肽提供理论基础。主要试验结果如下: 一、碱、酸水解 (1)咸鸭蛋蛋清的水解度随着 NaOH(或盐酸)浓度的增大、反应温度的 升高和水解时间的延长而增大。 (2)通过碱水解或酸水解,蛋清水解物的水溶性得到改善,受溶液PH 的影响减小。当水解度达到21%时,碱水解物水溶性指数可达到 10 mg/ml以上,酸水解物水溶性指数可达到8mg/ml以上。水解度 再增加时,水溶性指数有少量的增加。 (3)碱、酸水解物的热稳定性显著提高。水解度在21%以上的水解物热 稳定性指数分别达到9 mg/ml和 7mg加 以上。水解度相同时,碱 水解物比酸水解物的热稳定性指数要高。 (4)经碱水解的咸鸭蛋蛋清的乳化稳定性有较大增加,当水解度达 4.14%时,乳化稳定性最好,随着水解度的进一步增加,乳化稳定 性降低。经过酸处理的咸鸭蛋蛋清的乳化性降低。 (5)SDS-PAGE电泳图谱显示:经过碱、酸处理后的蛋清,小分子量的 成分增加,大分子蛋白质减少。 (6)50℃时的碱水解液呈浅黄绿色,有白色沉淀。75℃时的碱水解液呈 黄绿色,反应液底部出现白色絮状沉淀或悬浮物。100℃时的水解 液呈黄褐色,有白色沉淀。反应过程中有氨气放出,且随水解度的升高而增多。酸水解液随着盐酸浓度和温度的增加,产物的颜色可 变为淡红、浅红、浅褐色或深棕褐色。碱、酸水解液呈鲜咸味,略 有异味,无苦味。 (7)碱处理蛋白质引起氨基酸变旋和赖丙复合物的生成。由于D-型氨 基酸不能被生物利用以及赖丙复合物有潜在的毒害作用,因此碱处 理蛋白质的安全性受到置疑。酸水解蛋白质中常含有因脂肪分解而 产生的致癌物质——氯丙醇而应在食品中慎用。 二、单酶水解 (1)从水解度、水解时间和用酶水平的角度考虑,各种蛋白酶水解蛋清 的最佳条件如下: 底物:蛋清(蛋白质浓度8.8%)经过胶体磨处理,100℃加热15 分钟变性。胰酶水平2000u/g、PH8.0、 温度37℃、水解5小时可 以得到水解度为 17.9%的水解液;风味酶水平 160 LAPU/G、PH7.5、 温度 50℃、水解 7小时可以得到水解度为 12.7%的水解液;As1,398 蛋白酶水平 6000u/g、PH7.3、温度 45 ℃、水解 6小时可以得到水 解度为 19.4%的水解液。 (2)在 PH2-10 之间,脱盐鸭蛋蛋清蛋白酶水解物的可溶性氮含量不受 水解度影响。在 PH4时,水解度为 15.2%的胰酶水解物水溶性指数 可达7.8mg/ml:水解度为10%的风味酶水解物水溶性指数达到8.3 mg/ml;水解度为15%的As1.398蛋白酶水解物水溶性指数达到8.72 mg/ml。而脱盐鸭蛋蛋清水溶性指数为 3.17 mg/ml。 (3)在PH4,脱盐鸭蛋蛋清85℃受热5分钟发生凝固,而酶水解物不 产生凝胶,水解度为 15.2%的胰酶水解物热稳定性指数为 8.5mg/ml,水解度为 10%的风味酶水解物热稳定性指数为9.21mg/ml,水解度为15%的As1.398蛋白酶水解物热稳定性指数 为9.1。热稳定性随水解度提高而增强。 (4)脱盐鸭蛋蛋清经过有限地水解,可以增加乳化稳定性。经过胰酶水 解,水解度为9.3%时的水解物乳化稳定性指数在PH10达到最大 值,57mm。用风味酶水解所得产物乳化稳定性增加不大。而用 As1.398蛋白酶水解得到的水解物乳化稳定性有所减小。 (5)脱盐鸭蛋蛋清经过酶水解后,当水解度达到 15%-20%以上时,绝大 部分的大分子蛋白质被水解成分子较小的多肽。 (6)脱盐鸭蛋蛋清经过酶水解、离心后的上清液透明:胰酶水解物略带 动物脏器的气味,风味酶水解物风味芳香宜人;各种水解物口感涩 鲜,强度随水解度增加而增大,没有明显苦味。 三、双酶水解结论 (1)经过双酶水解,又有一部分变性的大分子蛋白质的肽链断裂,水解 度进一步增大,产生大量的短肽甚至是氨基酸,使水解度可以达到 81%。 (2)水解度的提高可使可溶性氮含量提高,水?