婴儿双歧杆菌介导HSV-tk/GCV对裸鼠肾细胞癌的治疗作用及对NF-kB活性影响

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目的:证实婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis,BI)介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(Herpes simplex virus thymidine kinase, HSV-TK)/丙氧鸟苷(Ganciclovir, GCV)自杀基因系统对裸鼠肾癌的治疗作用,检测其诱导裸鼠肾癌组织细胞的凋亡及对NF-KB信号通路的影响。方法:裸鼠皮下荷瘤肾癌模型采用引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液法建立,并随机分为BI-pGEX-TK/GCV组(重组质粒组)、BI-pGEX-5X-1/GCV组(空质粒组)、BI/GCV组(空双歧杆菌组)和生理盐水/GCV对照组(生理盐水组)。分别经尾静脉注射BI-pGEX-TK、BI-pGEX-5X-1、BI和生理盐水,同时腹腔注射GCV,4周后,称取裸鼠重量及肿瘤质量。各组肿瘤细胞凋亡情况采用TUNEL法检测,各组肿瘤组织Rel A、Caspase-3mRNA及蛋白表达水平运用qRT-PCR、Western blotting技术检测。结果:(1)BI-pGEX-TK/GCV组荷瘤裸鼠体重明显高于其余三组(p=0.006<0.01),肿瘤组织质量明显降低(p=0.003<0.01)。(2)TUNEL法检测显示各组均有不同程度的肿瘤细胞凋亡,以BI-pGEX-TK/GCV组最为显著(p=3.46113E-07<0.01)。(3)与BI-pGEX-5X-1/GCV组、BI/GCV组及生理盐水/GCV对照组比较,BI-pGEX-TK/GCV组Rel A蛋白表达明显下调(p=5.65095E-09<0.01),Caspase-3蛋白表达明显上调(p=1.27303E-07<0.01)。结论:婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV自杀基因系统对荷瘤裸鼠肾癌有明显的抑制作用,可能通过影响NF-KB信号通路的活性,诱导荷瘤裸鼠肾癌肿瘤细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。
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