灰葡萄孢菌，即灰霉菌（Botrytis cinerea）属于死体营养型病原真菌，能够侵染危害多达200种单子叶和双子叶植物。灰霉菌侵染导致的灰霉病被认为是危害作物生产、蔬菜质量及水果保鲜的第二大病害。而番茄丁香假单胞杆菌（Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000，Pst DC3000），是一种半活体营养型病原细菌，其引发的黑斑病也极大影响了作物生产。本文我们利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术分析逆境胁迫相关蛋白SAP家族和含有JmjC结构域的去甲基化酶JMJ家族在抗病中的功能，尤其重点研究SlSAP3、SlSAP4以及SlJMJ7在番茄与B.cinerea和Pst DC3000互作中可能的作用机制。
　　植物SAP主要参与对非生物胁迫如冷、热、干旱、高盐、渗透压以及重金属的响应及调控。番茄SAP家族共有13个成员，多数能够响应病原菌及植物激素的诱导，VIGS沉默SlSAPs接种B.cinerea发现，SlSAP4和SlSAP10沉默后降低番茄对B.cinerea的抗性;接种Pst DC3000，SlSAP3和SlSAP10沉默后对PstDC3000的抗性减弱。由于SlSAP10沉默植株表现叶片退绿黄化症状，叶绿素含量降低，本文不做深入研究。
　　研究发现，SlSAP4沉默植株对B.cinerea更加感病，接种B.cinerea后活性氧含量降低，并抑制B.cinerea诱导的JA/ET相关基因表达;同时烟草瞬时表达SlSAP4增强对B.cinerea的抗性。体外实验证明SlSAP4不具有体外泛素化活性，但能够与泛素穿梭/运输蛋白SlRAD23家族，除SlRAD23a外的SlRAD23c、SlRAD23d.1及SlRAD23d.2互作，且主要是SlSAP4的A20结构域与SlRAD23d.1的UBA结构域起作用。SlRAD23d.1沉默植株对B.cinerea的抗性降低，却并不改变其它3个成员沉默后的抗性。因此，我们认为SlSAP4主要通过调控B.cinerea诱导的活性氧积累，改变JA/ET相关基因表达，并可能参与SlRAD23介导的26S蛋白酶体途径，进而调控B.cinerea介导的抗性反应。
　　与SlSAP4功能不同，SlSAP3沉默植株对Pst DC3000抗性减弱，SlSAP3超表达植株对Pst DC3000抗性增强。SlSAP3沉默或超表达改变了Pst DC3000诱导的SA相关基因（SlPR1a、SlPR1b、SlPRp2和SlEDS1）的水平;影响flg22介导的PTI反应，如引发ROS产生，PTI下游基因SlPTI5以及SlLRR22的改变。SlSAP3同样不具有体外泛素化活性，却与非典型热激蛋白SlBOB1、SlBOB2互作，且能够与SlRAD23家族除SlRAD23a外的3个成员互作。进一步研究发现，SlBOB1沉默植株增强对Pst DC3000抗性，且SlBOBs共沉默植株进一步提高了对Pst DC3000的抗性;SlRAD23s沉默植株对Pst DC3000的抗性却并不显著。以上表明，SlSAP3能够正调控Pst DC3000的抗性反应，可能与SlBOB和SlRAD23介导的26S蛋白酶体途径相关。
　　含有JmjC结构域的蛋白家族是植物中广泛存在的一类去甲基化酶家族，参与植物生长发育及抗病的调控，该家族在番茄中有23个成员，多数成员能够响应病原菌及植物激素的诱导，VIGS沉默22个SlJMJs后接种B.cinerea，发现SlJMJ7和SlJMJ13沉默后增强对B.cinerea的抗性，而SlJMJ20沉默后降低对B.cinerea的抗性，本研究以SlJMJ7功能研究为主。SlJMJ7沉默植株降低B.cinerea侵染后期活性氧水平，并提高JA途径及防御基因表达，抑制SA相关基因的水平，进而提高对B.cinerea的抗性;但是SlJMJ7超表达植株并不改变B.cinerea的致病表型。另一方面，接种Pst DC3000后，沉默植株对Pst DC3000的抗性增强，提高Pst DC3000诱导的SA相关基因以及PTI相关基因SlPTI5、SlWRKY28的表达;而超表达植株抗性减弱，抑制Pst DC3000诱导的SA及PTI相关基因表达。SlJMJ7含有保守的Fe(Ⅱ)和α-酮戊二酸酶活性位点，能够催化H3K9me2/3去甲基化，并且能够与转录因子SlLBD42互作。SlLBD42沉默植株增加对B.cinerea抗性，而削弱对Pst DC3000抗性。以上结果表明，SlJMJ7在B.cinerea和Pst DC3000介导的抗性反应中发挥重要作用，并可能与转录因子共同参与调控番茄对病原菌的互作反应。