HLA-G是一种非经典的HLAⅠ类分子，可以通过与抑制性受体结合诱导广泛的免疫耐受。大量研究证实可溶性HLA-G二聚体与其抑制性受体的结合力更强，可以诱导更强的免疫耐受。这些抑制性受体包括ILT-4和ILT-2，主要表达在T细胞，B细胞，巨噬细胞，NK，DC等表面。DC是重要的抗原提呈细胞，连接了固有免疫与适应性免疫，它们可以发现、捕获，加工处理外源性抗原并提呈给T细胞。它们与原始T细胞的相互作用在诱导T细胞分化成Th1/Th2细胞、调节性T细胞中起重要作用。近年来有不少文献报道可溶性HLA-G二聚体能够通过与抑制性受体ILT-4结合抑制DC的成熟，但也有人报道可溶性HLA-G二聚体对DC的成熟没有影响。本研究拟探讨可溶性HLA-G二聚体对DC成熟的作用，以期这种二聚体可以抑制DC的成熟，进一步诱导T细胞、B细胞的免疫耐受，降低移植排斥反应的程度。巨噬细胞参与和促进炎症反应，根据其微环境的不同可分为经典的M1与选择性激活的M2。前者与炎症反应和组织损伤有关；后者可促进血管生成和组织修复，并且参与寄生虫感染与过敏反应，在一定条件下两者可以相互转化。由于巨噬细胞表面也存在可溶性HLA-G二聚体的受体，所以本实验将探讨可溶性HLA-G二聚体对这两种细胞极化的影响，研究可溶性HLA-G二聚体在炎症反应中的作用。论文分为2个部分，主要内容与结果如下：1.可溶性HLA-G二聚体在体外可抑制树突状细胞成熟由人外周血分离得到PBMC，贴壁单核细胞在GM-CSF、IL-4的作用下分化成未成熟DC，而TNF-或IFN-γ可促进DC成熟。同时在此过程中加入可溶性HLA-G二聚体，并设置721.221上清作为对照。用流式抗体CD1a，CD83，CD40染色，流式细胞仪检测各组细胞表面这三种分子的表达水平。检测结果显示：可溶性HLA-G二聚体组DC表面CD83及CD40表达水平比721.221上清对照组明显下降。2.可溶性HLA-G二聚体在体外可抑制M1型巨噬细胞极化由人外周血分离得到PBMC，贴壁单核细胞在GM-CSF与LPS刺激下得到M1；用M-CSF与IL-4刺激得到M2。并在实验组加入可溶性HLA-G二聚体，并设置721.221上清作为对照。用流式抗体CD14，CD80，CD206染色，流式细胞仪检测M1组细胞表面CD14+CD80+的表达水平，M2组细胞表面CD14+CD206+的表达水平。流式细胞仪检测结果显示：可溶性HLA-G二聚体可以降低M1表面CD80的表达水平，而对M2表面的CD206表达没有影响。