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池塘工程化循环水养殖系统通过集约化形式,整合空间资源,实现小面积的集中养鱼、大面积生态化净水,并配套实时在线监测水质网络系统、废物处理装置和气提推水增氧装备以及绿色净化水生动植物等,从而实现水产绿色健康养殖的模式。此养殖系统下养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)具有良好的经济和生态优势。投喂频率直接影响养殖水环境和饲料利用率,从而影响鱼的生长与健康,因此,池塘工程化循环水养殖系统投喂频率的研究显得尤为重要,目前相关研究较少。鉴于此,本研究选取初始体重为(5.0±0.4)g的大口黑鲈为研究对象,设置3个投喂频率试验组(2次/d、3次/d、4次/d),每组设置3个重复,采用饱食投喂,进行为期120 d的养殖试验。通过组织生理学、分子生物学等手段分析生长性能、免疫力、抗氧化能力、消化吸收以及脂肪代谢基因表达,综合分析得出适宜投喂频率,旨在为池塘工程化循环水养殖投喂策略提供科学的参考,助推新模式的示范与推广。1.投喂频率对大口黑鲈生长、体成分及GH和IGF-I基因表达的影响研究了池塘工程循环水系统养殖模式下,投喂频率对大口黑鲈生长性能、体成分及GH和IGF-I基因表达的影响,实验结果表明,成活率高达90.07%～92.01%。在实验第30 d和60 d时,投喂频率对大口黑鲈末体质量、增重率和特定生长率均没有显著性影响(P>0.05),而在第90 d时,2次/d组大口黑鲈生长率明显高于4次/d组(P<0.05),与3次/d组无显著差异(P>0.05);第120 d时,2次/d组大口黑鲈生长显著高于3次/d组和4次/d组(P<0.05);2次/d、3次/d、4次/d组大口黑鲈变异系数无明显差异(P>0.05);投喂频率对鱼体灰分和脂肪含量具有显著影响,其中,2次/d投喂组大口黑鲈灰分含量明显高于3次/d和4次/d组,而2次/d组体脂肪含量低于3次/d和4次/d组(P<0.05),投喂频率对大口黑鲈体水分和粗蛋白含量无明显影响(P>0.05);第30 d、第60 d和第120 d时,大口黑鲈肝脏IGF-I基因2次/d组的相对表达量最高(P<0.05),第90 d时大口黑鲈肝脏IGF-I各投喂频率组间相对表达量无明显差异(P>0.05);第30 d和第60 d时,大口黑鲈肝脏GH基因相对表达量没有受到投喂频率的影响(P>0.05),而第90 d和第120 d时4次/d组肝脏GH基因相对表达量显著低于2次/d组(P<0.05)。2.投喂频率对大口黑鲈血清生化、抗氧化酶活性和肝脏组织的影响血清生化指标和肝脏抗氧化酶活性结果显示,投喂频率对大口黑鲈血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、和碱性磷酸酶(ALP)活性、溶菌酶、皮质醇和甘油三酯(TG)含量、碱性磷酸酶(ALP)活性、溶菌酶、肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含活性量均无显著性影响(P>0.05);随着投喂频率的增加,血糖(Glu)含量呈降低的趋势,而血清总胆固醇(TC)含量呈上升的趋势。2次/d投喂组肝脏过氧化氢酶(CAT)活性及血清总蛋白(TP)活性比3次/d和4次/d更高;第30 d时投喂频率对肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性无显著性影响,而第60 d、第90 d和第120d时,4次/d组T-SOD活性显著低于2次/d组(P<0.05)。肝脏组织学显示,投喂频率越高肝脏脂肪堆积加重,与2次/d和3次/d组相比较,4次/d组肝细胞偏移、空泡化的现象较明显。3.投喂频率对大口黑鲈肠道组织健康和消化酶活性的影响通过组织切片观察,研究了投喂频率对大口黑鲈肠道组织健康状况的影响,结果发现,投喂频率对大口黑鲈肠道绒毛高度和宽度影响不显著(P>0.05),而4次/d组肠道绒毛排列整齐度下降且肌层厚度显著低于2次/d和3次/d组(P<0.05);投喂频率对肠道消化酶具有显著影响,其中,2次/d组肠道淀粉酶活性要高于4次/d组(P<0.05),脂肪酶活性也呈现出类似的变化趋势。4.投喂频率对大口黑鲈脂质代谢HL和LPL基因表达的影响为了研究池塘工程化循环水养殖模式下,投喂频率对大口黑鲈脂质代谢和消化能力的影响,对大口黑鲈HL和LPL基因丰度进行检测,HL和LPL基因的表达分析结果显示,在第60 d和90 d,2次/d组LPL相对表达量显著高于4次/d组(P<0.05),而在第120天d时投喂频率对大口黑鲈肝脏LPL的基因相对表达量无影响,而2次/d组肝脏HL相对表达量高于其余两组。综合分析,在饱饲投喂条件下,池塘工程化循环水养殖大口黑鲈的适宜投喂频率为2次/d。