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目的:研究高危型(High risk,Hr)HPV16、18型感染及HPV阴性的宫颈癌上皮细胞m RNA的异质性,探讨HPV DNA在宿主细胞中基因整合状态及转录状态的差异性;研究Hr HPV16、18型感染及HPV阴性的宫颈癌上皮细胞在一定时间内不同浓度的外源性TRAIL作用下的凋亡效力及剂量时效关系,为宫颈癌的防治提供新的方向。方法:以正常人宫颈上皮细胞Hcerepic细胞作为对照组,HPV16型感染的宫颈癌上皮细胞-Siha细胞、HPV18型感染的宫颈癌上皮细胞-Hela细胞及HPV阴性的宫颈癌上皮细胞-C33a细胞作为实验组,用m RNA测序方法检测Hcerepic细胞、Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞基因转录情况;不同浓度(0 ng/ml、100 ng/ml、200ng/ml)TRAIL处理Hcerepic细胞、Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞2h后:(1)采用吖啶橙染色法及流式细胞学技术检测不同TRAIL浓度作用下,Hcerepic细胞、Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞的细胞凋亡情况及细胞凋亡率。(2)应用蛋白免疫印迹法检测不同TRAIL浓度作用下,Hcerepic细胞、Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞的TRAIL及其受体的表达变化情况。结果:(1)对各组细胞进行m RNA检测,四种样本之间存在样品间异质性,Siha细胞、Hela细胞存在同源异质性,C33a细胞可能有其他特有基因决定C33a细胞的生物学特点。(2)用吖啶橙染色法检测,在不同浓度(0 ng/ml、100 ng/ml、200ng/ml)TRAIL作用2h后,发现Hcerepic细胞存活细胞无明显变化;Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞随TRAIL浓度的增加,存活细胞减少,凋亡细胞逐渐增加;各组增加的凋亡细胞排序依次为:Siha细胞组>Hela细胞组>C33a细胞组。(3)用流式细胞学方法检测,不同浓度(0 ng/ml、100 ng/ml、200ng/ml)TRAIL下,随着TRAIL浓度的增加,Hcerepic细胞组凋亡率变化不大;Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞均随着TRAIL浓度的增加,凋亡率渐增;凋亡率增加净值排序依次为:Siha细胞组>Hela细胞组>C33a细胞组。(4)在不同浓度(0 ng/ml、100 ng/ml、200ng/ml)TRAIL下,用蛋白免疫印迹法检测Hcerepic细胞的TRAIL及死亡受体表达无明显改变,诱骗受体表达随TRAIL浓度的增加而增加。(5)Siha细胞、Hela细胞、C33a细胞的TRAIL及诱骗受体的表达无明显变化,死亡受体表达随TRAIL浓度的增加而增加;各组死亡受体表达增加净值排序依次为:Siha细胞组>Hela细胞组>C33a细胞组。结论:(1)Siha细胞及Hela细胞存在同源异质性,可能与Hr HPV感染有关;无HPV感染的C33a细胞可能有其他特有基因突变决定C33a细胞的生物学特点。(2)外源性TRAIL对不同Hr HPV感染及HPV阴性的宫颈癌上皮细胞均有诱导细胞特异性凋亡作用。(3)外源性TRAIL在一定浓度作用范围及一定时间内,对宫颈癌上皮细胞的促凋亡具有剂量依赖性。TRAIL对不同宫颈癌上皮细胞凋亡的效力大小可能与是否有HPV感染及HPV感染类型有关。(4)外源性TRAIL作用下,正常宫颈上皮细胞通过增加诱骗受体与TRAIL结合使细胞免受凋亡;宫颈癌上皮细胞通过增加死亡受体与TRAIL结合使细胞凋亡。TRAIL诱导宫颈癌上皮细胞凋亡的特性有望为宫颈癌诊治提供新的思路。