【摘 要】
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氟苯尼考作为一种新的兽医专用氯霉素类广谱抗菌药,广泛用于治疗畜禽及水产品的细菌性疾病。但是因为一些人不熟悉兽药的使用方法及经济利益的诱惑,畜牧业中误用、滥用兽药的行为比比皆是,而此类情况会造成氟苯尼考在动物源性食品中残留,从而危害消费者健康。仪器分析检测方法中可以对抗生素类药物进行定性及定量分析,虽然准确度高,但是检测工序复杂,检测周期长,检测费用较高,不能用作氟苯尼考的批量检测,而且此类检测方法
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氟苯尼考作为一种新的兽医专用氯霉素类广谱抗菌药,广泛用于治疗畜禽及水产品的细菌性疾病。但是因为一些人不熟悉兽药的使用方法及经济利益的诱惑,畜牧业中误用、滥用兽药的行为比比皆是,而此类情况会造成氟苯尼考在动物源性食品中残留,从而危害消费者健康。仪器分析检测方法中可以对抗生素类药物进行定性及定量分析,虽然准确度高,但是检测工序复杂,检测周期长,检测费用较高,不能用作氟苯尼考的批量检测,而且此类检测方法需要较为对口专业的检测人员,所需检测设备较为昂贵,也不利于推广此类检测方法。本研究通过建立快速检测鸡肉中氟苯尼考的酶联免疫法,并进行优化,组建氟苯尼考残留的ELISA试剂盒,实现对动物食品中氟苯尼考残留的快速检测,确保食品安全,保障消费者健康。主要工作如下:（1）通过对包被液、包被条件、反应缓冲体系及反应时间等条件优化,得到氟苯尼考间接竞争ELISA方法的最佳反应条件,即:包被抗原的质量浓度为0.0307μg/L,抗体稀释比例为1:20000,标准品稀释液为水,抗体稀释液为P液,最佳竞争时间为20 min。在最佳反应条件下以氟苯尼考标准品浓度的对数值为横坐标（X）,以吸光度比值百分比B/B0%为纵坐标（Y）,绘制标准曲线。标准曲线拟合度好,其曲线相关系数R~2为0.9946,IC50为5.01μg/L,线性检测范围(IC20～IC80)为2.13～32.00μg/L。（2）考察基质对氟苯尼考ic-ELISA反应的影响,结果显示样品基质对ic-ELISA检测基本无影响。（3）从氟苯尼考ic-ELISA方法特异性、灵敏度、准确度、精密度、稳定性等几个方面对建立试剂盒性能进行评价,结果显示:（1）所用的氟苯尼考抗体特异性好,除甲砜霉素以外,与结构类似物和功能类似物的交叉反应率均小于0.01%,受其他化合物的影响小。（2）通过对不同鸡肉空白样品进行检测,得到样品的LOD值为4.19μg/L和LOQ值为11.19μg/L。（3）选择高中低三个添加水平进行实际鸡肉样品的氟苯尼考添加回收试验,添加回收率均在102.87%～121.30%之间,变异系数＜15%,方法适用于实际样品检测。采用ic-ELISA法和UPLC-MS/MS法对4份不同加标鸡肉样品进行检测,对比检测结果,两种方法的相关性R~2达到0.9977,说明所建立的ic-ELISA法可以用来检测鸡肉中氟苯尼考的含量。（4）对同一批次不同试剂盒进行检测,当质量浓度在27.00～81.00μg/L范围内,方法重复性较好。（5）将同一批包被试剂盒放置在4℃可保存半年,试剂盒检测效果无明显变化。
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