基于表面等离子共振生物传感器的牛奶中抗生素残留检测

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随着食品安全问题的深入研究,抗生素残留问题开始引起了越来越多的关注。抗生素在动物性食品内的残留会危害食用者的身体健康。国际食品贸易中常因抗生素残留问题引起摩擦。因此,寻求简便、快速、准确、敏感性高的检测方法满足日趋严格的残留限量要求势在必行。本文提出采用基于表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance-SPR)技术的生物传感器检测牛奶中抗生素残留的方法。通过自组装分子技术将单克隆抗体固定到传感器金膜表面制成生物传感器,用生物分子相互作用原理(Bio-molecular Interaction Analysis-BIA)检测与单克隆抗体产生免疫特异性反应的抗原,即牛奶中的抗生素。该方法具有高灵敏度、实时、快速和免标记等特点,为探索适合抗生素残留检测的最优方法提供了可靠的依据,具有广泛的市场前景和应用价值。首先,本文采用该方法对氨苄青霉素水样品进行了检测,验证了实验原理的可行性,并从流速、温度、pH值、离子浓度和抗体在传感器表面的覆盖量几个方面深入分析了测量条件对检测的影响,获得了该检测方法的最佳测量条件。在此条件下进行了实验,得到不同浓度氨苄青霉素水样品的工作曲线。所采用的绑定后传感器,其检测的最低检出限(Limit of Detection,LOD)低于1.25ng/ml,明显低于欧盟规定的最大检出限(Maxium Residue Limit,MRL)4ppb(4.1ng/ml)。进一步,本文研究了牛奶成分对抗生素检测的影响,探讨了如何对牛奶溶液进行预处理,以最终实现牛奶中抗生素残留的有效检测。主要针对牛奶在传感器表面产生的非特异性绑定问题,研究了降低其影响的方法。经过实验表明,对牛奶进行脱脂并稀释4倍后,可基本消除牛奶非特异性绑定的影响。因此,采用预处理后的牛奶溶液进行了实验,得到了不同浓度的氨苄青霉素牛奶样品的工作曲线。采用的传感器,其最低检出限LOD低于1.56ng/ml(CV为7.8%),也明显低于了欧盟规定的MRL。因此,本文全面探讨了利用表面等离子体共振生物传感器检测牛奶中抗生素残留的检测方法,不仅对影响检测的多种实验条件进行研究,获得了最佳实验条件,并且针对氨苄青霉素的水溶液、牛奶溶液都进行了有效的检测,获得了较好的测量效果。
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