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目的: 探讨周围神经损伤及神经修复后推拿手法促进神经生长及延缓骨骼肌萎缩的作用机理。 方法: 实验对象:雄性SD大鼠120只,体重220~230g,随机分为3组,制备骨骼肌失神经动物模型(48只);坐骨神经缝合动物模型(48只);空白对照组动物模型(24只)。除空白对照组外每组大鼠再分为两个亚组即手法+主动运动组(24只)和模型对照组(24只);每亚组大鼠于造模后的第2、3、4、8周共4个时间点分别取6只大鼠检测指标并处死取材。观测指标:斜板试验;机械痛阈;热痛阈;腓肠肌湿重;腓肠肌收缩力与收缩位移;卫星细胞计数;腓肠肌及坐骨神经切片光镜HE染色观测;坐骨神经传导速度,坐骨神经轴突计数;雪旺氏细胞计数;免疫组化(IGF-1、Myod、bFGF、NGF含量)。 结果: 1、推拿手法对大鼠神经损伤后功能康复的影响 (1)斜板试验统计显示,神经缝合因素有统计学意义(P<0.05),神经缝合是大鼠下肢功能恢复的主要因素,推拿治疗在第3、8周对大鼠下肢功能的恢复有明显的促进作用。 (2)痛阈测试统计显示,机械痛阈的神经缝合因素、时间点有统计学差异(P<0.05);热痛阈结果中神经缝合因素和干预方法、时间点均有统计学差异(P<0.05),说明神经缝合、手法干预及时间点对痛阈均有影响,手法能够促进神经损伤后热痛阈的恢复。 2、推拿手法对大鼠神经损伤后骨骼肌萎缩的影响 (1)大鼠腓肠肌湿重比结果显示,神经缝合因素有统计意义(P<0.05),手法因素无统计意义,缝合是各组大鼠腓肠肌湿重有差别的主要因素。手法在治疗第4周能明显促进神经缝合大鼠腓肠肌湿重增加。 (2)大鼠腓肠肌收缩力、收缩位移结果显示:对于腓肠肌收缩力,缝合因素有统计学差异(P<0.05),手法有促进神经缝合组大鼠腓肠肌收缩力增加的趋势;对于收缩位移,缝合因素及时间点有统计学差异(P<0.05),手法对收缩位移的影响不明显。 (3)大鼠腓肠肌IGF-1含量结果显示,缝合因素与时间有统计学意义(P<0.05);对于失神经模型,手法能提高腓肠肌IGF-1含量,对于神经缝合模型,手法在后期能够提高其含量。 (4)大鼠腓肠肌Myod含量结果显示,缝合因素与时间有统计学意义(P<0.05);在失神经及神经修复早期,手法有提高骨骼肌中Myod的含量的作用。 (5)大鼠腓肠肌bFGF含量结果显示,缝合因素与时间有统计学意义(P<0.05);在失神经及神经修复早期,手法就能提高骨骼肌中bFGF的含量,但4周之后手法作用消失。 (6)大鼠腓肠肌NGF含量结果显示,缝合因素与时间有统计学意义(P<0.05);在失神经模型中,手法在早期能增加骨骼肌NGF含量,而神经缝合模型中,手法在3到8周能增加骨骼肌NGF含量。 (7)肌卫星细胞统计结果显示,缝合因素有统计学意义(P<0.05),说神经缝合是造成肌卫星细胞差别的主要原因。手法在早期可增加失神经及神经缝合后腓肠肌卫星细胞数目,且失神经手法组高于神经缝合手法组。 3、推拿手法对大鼠周围神经损伤后神经再生的影响 (1)坐骨神经传导速度结果显示:干预方法有显著统计学意义(P<0.05);神经缝合手法组大鼠坐骨神经传导速度呈逐渐上升趋势,且均高于对照组,提示手法可以保持并加快神经损伤修复后的坐骨神经传导速度。 (2)大鼠坐骨神经轴突计数统计结果显示:干预方法和时间点均有统计学意义(P<0.05);两组大鼠坐骨神经轴突数目在四个时间点基本呈逐渐下降趋势,神经缝合手法组大鼠坐骨神经轴突数目在第2周时高于对照组,之后开始下降,而神经缝合对照组在第4周出现明显下降趋势。 (3)雪旺氏细胞计数统计结果:干预方法有统计学意义(P<0.05);除第2周外,手法组雪旺氏细胞计数均高于对照组,说明手法能增加神经雪旺氏细胞数目并能维持较长时间。 结论: (1)推拿手法可以改善失神经组和神经缝合组大鼠下肢的运动与感觉功能。 (2)推拿手法可以延缓神经缝合组大鼠腓肠肌湿重的下降。 (3)推拿手法能够在失神经及神经缝合后某些阶段影响IGF-1、Myod、bFGF和NGF的表达。 (4)推拿手法在早期有促进失神经及神经缝合组大鼠肌卫星细胞增殖的作用。 (5)推拿手法能够加快神经缝合组大鼠坐骨神经传导速度。 (6)推拿手法能够调节坐骨神经轴突的再生和雪旺氏细胞增殖,促进神经修复后的再生。