背景和目的EHMT2(G9a)是一种组蛋白甲基化转移酶,其可通过调控组蛋白的修饰影响着肿瘤的生长,在恶性肿瘤发生、发展中起到了重要作用,BIX-01294是一种人工合成的EHMT2靶向抑制剂,有实验表明,BIX-01294可以抑制多种恶性肿瘤的增殖、侵袭,促进其凋亡、自噬,然而在神经胶质瘤中相关的研究较少。因此,利用BIX-01294靶向干预EHMT2后对胶质瘤细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,从而进一步探究其对胶质瘤细胞发生、发展及可能的作用机制。一、材料和方法我们选取两株不同的胶质瘤细胞株,进行细胞培养,并利用BIX-01294靶向抑制EHMT2(G9a)后,通过实时荧光定量PCR、Western Blot检测EHMT2在细胞中表达水平的改变,随后检测细胞增殖、侵袭和凋亡功能的变化并检测相应蛋白水平变化。Western Blot分析可能有关的信号通路上相关蛋白的表达变化。二、结果1、BIX-01294抑制胶质瘤细胞中EHMT2的表达BIX-01294处理细胞后Western Blot显示EHMT2蛋白表达明显下降,同时实时荧光定量PCR显示EHMT2的RNA表达明显下降,且上述结果随药物的浓度上升抑制效果明显。2、BIX-01294抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭,促进凋亡BIX-01294处理细胞后,流式细胞仪分析细胞周期结果提示药物处理后细胞增殖能力下降,Transwell实验提示胶质瘤细胞侵袭能力下降,CCK8实验提示药物处理后促进细胞的凋亡。3、BIX-01294 处理细胞后 MMP2、Rac1、Bcl2、Bax、Caspase3、PARP 等蛋白表达发生改变BIX-01294处理细胞后,Western Blot结果显示关于细胞侵袭的MMP2、Rac1蛋白表达下降,提示细胞侵袭能力下降。Bc12表达下降,Bax、Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP蛋白表达上升,提示细胞凋亡增强。4、BIX-01294处理细胞后p-STAT3蛋白表达下降BIX-01294处理细胞后Western Blot结果提示p-STAT3蛋白的表达明显下降,提示BIX-01294抑制EHMT2后可能通过影响STAT3的表达抑制细胞增殖、侵袭,促进细胞凋亡。三、结论BIX-01294可以抑制神经胶质瘤细胞中EHMT2的表达,从而通过影响STAT3的表达抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭,促进胶质瘤细胞的凋亡。